组蛋白翻译后修饰通过影响染色质的结构,对调节基因表达和重塑染色质构型起重要作用。其中,组蛋白甲基化是发生在组蛋白尾部的重要翻译后修饰。在很长一段时间,组蛋白甲基化被认为是一种静态不可逆的修饰,直到第一个组蛋白去甲基化酶（HDMs）—赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1）的发现,揭示了组蛋白甲基化的可逆调节机理。HDMs参与体内许多生物过程,其异常表达与多种疾病相关。因此,分析HDMs活性对于表观遗传学研究、药物发现和临床诊断方面具有非常重要的意义。然而,目前用于检测HDMs的方法仍然有限。本文基于HDMs催化组蛋白去甲基化过程中产生副产物甲醛（HCHO）这一机理,开发了HCHO检测的新方法,并成功用于LSD1活性的高灵敏、高选择性测定,具体研究工作如下:1.构建了具有荧光、比色双信号的传感新方法用于HCHO的高灵敏检测。银离子（Ag+）可将无色的邻苯二胺（OPD）催化氧化成黄色的2,3-二氨基吩嗪（OPDox）,同时发出亮黄色荧光。我们发现当体系中存在HCHO时,HCHO会阻碍Ag+对OPD的氧化,不能引起溶液颜色变化和产生荧光。通过调整HCHO加入顺序、改变Ag+和OPD浓度以及透射电镜（TEM）表征实验对机理进行探究和分析,我们推断HCHO是通过改变生成的银纳米粒子（Ag NPs）形貌,影响其催化能力,进而阻碍Ag+对OPD的氧化。通过一系列条件优化,该传感方法成功实现了HCHO的高灵敏检测,对HCHO的线性响应范围分别为0-60μM,检测限低至0.29μM（荧光）和0.33μM（比色）。此外,该方法对于常见的离子和小分子具有良好的选择特异性。2.基于上述HCHO检测体系进一步构建了荧光、比色双信号传感新方法用于LSD1活性的检测。根据LSD1催化组蛋白去甲基化过程中产生HCHO这一机理,我们将构建的HCHO响应的荧光、比色双信号传感新方法进一步用于LSD1活性的检测。实验结果表明,该传感方法能够实现LSD1的活性检测,线性响应范围为0-300 nM,检测限低至0.3 nM（荧光）和0.5 nM（比色）。用该方法评估LSD1抑制剂（GSK-LSD1）对LSD1的抑制作用,计算得出其IC50值为10.23 nM。此外,我们还将该传感方法用于不同细胞裂解液中LSD1的活性评估,发现Hep G2细胞中LSD1活性约为LO2细胞中的2.4倍,与Western Blot（WB）结果和文献报道结果相一致,这体现了我们的方法具有用于临床诊断的潜力。3.合成了N-丙基-4-肼基萘二甲酰亚胺（Na-FA）作为小分子荧光探针用于LSD1活性检测。我们通过两步法合成了Na-FA分子,分离纯化后进行了核磁表征。该探针对HCHO具有“turn on”的荧光特异性响应,能实现HCHO的高灵敏检测。将该探针进一步用于LSD1活性的检测,对LSD1的荧光响应范围为5-500nM,检测限为0.8 nM。此外,成功实现了Hela细胞裂解液中LSD1的活性检测。