益气活血方对脑缺血再灌注大鼠Nrf2、NQO1表达及氧化应激反应的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nimadebiri
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目的:探讨益气活血方对脑缺血再灌注损伤大鼠Nrf2(重组与合成蛋白)、NQO1(醌氧化还原酶)表达及氧化反应的影响。方法:选用健康雄性SPF级SD大鼠40只,经适应性饲养1周后,采用随机数字表法随机分为假手术组(10只)与模型制备组(30只)。模型制备组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO/R),随后筛选出造模成功的大鼠采用随机数字表法分为模型组、益气活血方组及西药组,每组包含10只大鼠。假手术组、模型组灌服等体积蒸馏水并同时腹腔注射等体积生理盐水,中药组灌服等体积益气活血方并同时腹腔注射等体积生理盐水,西药组灌服等体积蒸馏水并同时腹腔注射等体积依达拉奉注射液,术后第14天处死大鼠取材。应用m-NSS评分法评价大鼠神经功能缺损程度;苏木素伊红(HE)染色观察脑组织细胞的形态变化;Western Blot检测脑缺血组织中Nrf2、NQO1的表达情况;试剂盒测定脑缺血组织中SOD活性、GSH含量、MDA含量、NO含量。实验数据用均数±标准差((?)±s)表示,组间两两比较且方差齐性时应用LSD法,方差不齐时应用Games-Howell法。p<0.05提示差异有统计学意义。结果:1.神经功能评分:假手术组无神经功能缺损。与模型组相比,中药组和西药组均可明显改善MCAO/R大鼠神经功能缺损症状(p<0.05),且中药组与西药组之间无明显统计学差异(p>0.05)。2.HE染色:假手术组皮质神经元未见损伤,神经细胞轮廓清晰,排列规整,结构完好,染色均一。模型组大鼠缺血区染色不均一,神经细胞变性缩小,细胞核固缩,细胞结构破坏,染色质边集,大量空泡形成。与模型组相比,中药组和西药组的神经细胞病理改变相对减轻,形态较好细胞增多,空泡减少,细胞轮廓较为清晰。3.Nrf2、NQO1表达情况:与假手术组相比,模型组、中药组及西药组在各个时相Nrf2、NQO1表达均提高(p<0.05)。与模型组相比,中药组及西药组Nrf2、NQO1表达明显升高(p<0.05)。中药组与西药组相比较,Nrf2、NQO1表达均无差异(p>0.05)。4.氧化应激相关指标测定:与假手术组相比,模型组大鼠MDA含量、NO含量显著升高,SOD含量、GSH含量显著降低(p<0.05)。与模型组相比,中药组和西药组大鼠MDA含量、NO含量均显著降低,SOD含量、GSH含量显著升高(p<0.05)。中药组和西药组氧化应激指标含量无差异(p>0.05)。结论:1.大鼠缺血再灌注后,益气活血方可明显改善大鼠神经功能缺损症状,降低其神经功能缺损评分,提高大鼠脑组织Nrf2、NQO1蛋白表达,抑制氧化应激反应,从而缓解大鼠脑缺血再灌注损伤。2.益气活血方与依达拉奉均能减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,两者治疗效果未见明显差异。
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