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目的:用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人外周血及脐血中CD4+CD25-T细胞转变为CD4+CD25+调节性T细胞,并对之进行表型及功能的分析、比较,探讨分离培养脐血来源的CD4+CD25+调节性 T细胞的可能性。 方法:采集产科足月顺产儿的脐静脉血10例,再采集本校新生体检健康者外周静脉血10例,男女各5例。用免疫磁珠法(MACS)分选出CD4+CD25-T细胞,并用TGF-β1进行诱导,分别应用流式细胞术(FCM)、逆转录 PCR(RT-PCR)和抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较两组之间CD4+CD25+ T细胞转化率、抑制功能的差异。 结果: 1)用MACS的方法从脐血和外周血分选到纯度大于90%的CD4+CD25+T细胞。 2)脐血和外周血分选得到的CD4+CD25-T细胞在TGF-β1作用下CD25分子表达不同,经FCM分析,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义。 3)RT-PCR检测,脐血和外周血来源的CD4+CD25-T细胞经 TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+ T细胞和新鲜分离出的CD4+CD25+ T细胞均表达Foxp3,且TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞的Foxp3的表达量可能更高 4)3H-TdR掺入试验中在加入脐血和外周血来源的经TGF-β1诱导产生的细胞后cpm值分别为:11739±352和18732±437,阴性对照和阳性对照的cpm值为:38283±328、1300±94,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1)采用免疫磁珠法从人外周血及脐血中分离出的CD4+CD25-T细胞经TGF-β1诱导均可产生具有免疫抑制功能的CD4+CD25+调节性T细胞,在数量及抑制功能上脐血优于外周血。 2)脐血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。