调控水稻叶绿体发育基因YGL3的图位克隆及功能研究

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danhun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
叶绿体作为植物光合作用的场所,其将光能转化为化学能为植物的生长发育提供能量来源,研究其发育机理有助于提高作物的光能转化效率,为高产育种提供一定的理论依据。本研究以一个从水稻不育系株1S经EMS诱变的突变体库中分离出的能稳定遗传的黄叶突变体ygl3(yellow green leaf 3)为研究对象,从细胞学角度、分子生物学等角度对其功能进行了深入研究,主要结果如下:1、突变体ygl3苗期表现为黄叶表型,随着自身的发育和温度的升高,其黄叶表型渐渐变为黄绿条纹状,最终叶色与野生型类似。与野生型相比,突变体ygl3叶片中的叶绿素含量显著下降,叶绿素合成速率减慢,叶肉细胞中叶绿体数目减少且发育异常,特别是类囊体片层结构损坏、基粒堆积异常。温度处理表明,突变体ygl3的表型受低温诱导,温度越低,黄叶表型更加明显,叶绿体损伤更加严重。光合指标测定发现,突变体ygl3的净光合速率和蒸腾速率显著弱于野生型。2、遗传分析表明,突变体ygl3的黄叶表型受一对隐性核基因控制。利用突变体ygl3与日本晴杂交构建的F2群体将YGL3基因定位于3号染色体上,标记Inde3和Indel4之间,约122kb的距离内;利用Rice Genome Annotation Project数据库分析发现,定位区间内含有12个开放阅读框(ORF);测序分析发现,ORF10(LOC_Os03g52170)的第二个外显子上发生A-T的突变,导致天冬酰胺变成异亮氨酸;通过遗传互补和基因编辑实验确定了LOC_Os03g52170即为目的基因YGL3。生物信息学分析发现,YGL3编码一个含LYTB结构域的4-羟基-3-甲丁-2-烯基二磷酸还原酶,属于MEP通路。3、实时荧光定量分析表明,YGL3呈组成型表达,在根、茎、叶、叶鞘、穗和不同发育时期的种子中均有表达,但在叶片组织中表达量最高,与GUS染色的结果一致;对不同时期的叶片组织进行定量分析发现,YGL3主要在幼叶中表达;亚细胞定位结果表明,YGL3蛋白定位于叶绿体中,且其N端1-31aa是其叶绿体靶向信号肽;免疫印迹和q RT-PCR分析表明,与野生型相比,突变体ygl3中类囊体膜复合体组分PSI、PSII、Cytb6f和ATP synthase相关基因的蛋白水平和转录水平显著下降,叶绿素合成相关基因的转录水平显著下降。此外,转录分析显示,在突变体ygl3中MEP途径和MVA途径出现了紊乱。4、酶联免疫吸附测定(ELISA)结果表明,YGL3具有4-羟基-3-甲丁-2-烯基二磷酸还原酶活性,且突变后导致酶活性降低;异戊烯基焦磷酸(IPP)含量测定表明,突变体ygl3中IPP含量显著降低。5、酵母单杂交、荧光素酶活性测定和凝胶电泳迁移实验发现,OsPIL11能结合YGL3的启动子并激活其表达。过表达OsPIL11能增加幼苗去黄化过程中叶绿素的合成速率。此外,YGL3编码区具有明显的籼粳分化。
其他文献
手性是某些分子和离子的几何性质,是指具有一定构型或构象的分子或离子与其镜像不可重叠的一种特性。不对称碳中心的存在是导致有机和无机分子手性的几个结构特征之一。手性化合物广泛存在于自然界及生物体内,对映异构体往往表现出截然不同的生物活性。分离、合成高光学纯度的手性化合物是化学、生物、医学、材料等相关领域的一个热点研究方向。近二十年来,有机不对称催化剂因其原料易得、环境友好、以及温和的催化条件等优点而广
本研究主要讨论了“9·11”事件以来,中巴双边关系为什么以及如何受地区和全球发展影响。在这一视角下,本研究分析了中巴关系在战略、经济和政治领域的持续发展。几十年来,中巴关系在战略、经济、政治等各领域都取得了长足发展。在区域方面,本文重点阐述了中国和巴基斯坦的关系演变、印度对中巴关系的阻碍以及中国同阿富汗和伊朗双边关系的重大发展。而全球层面,本文研究的是印美战略伙伴关系、新兴世界秩序以及“一带一路”
学位
卟啉化合物是一类光电性能优异、结构稳定、应用领域广泛的大环平面共轭分子,但是其大的盘状结构使得它容易通过π-π堆积而发生荧光淬灭,因此是一类典型的聚集诱导淬灭(Aggregation Caused Quenching,ACQ)分子,严重限制了卟啉类化合物的应用。聚集诱导发光(Aggregation-Induced Emission,AIE)概念的提出为克服传统染料的ACQ效应提供了 一个新颖的解决
背景:结直肠癌是最常见的消化系统恶性实体肿瘤之一,严重影响着人们的身体健康。临床研究和实践已经观察到,由慢性肠炎发展到腺瘤,进而再进展到腺癌的现象。这种由正常细胞演进到癌细胞的过程必然伴有多种基因的表达变化和细胞代谢通路的改变。既往的研究显示:盘状结构域受体1(Discoidin Domain Receptor1,DDR1)是新型的受体型蛋白酪氨酸激酶家族成员之一,其在调节细胞增殖、代谢、迁移等生
环氧树脂是应用最广泛的热固性聚合物之一,具有许多优良的特性,已被广泛应用于涂料、电子、航天航空等领域,但是其易燃性以及燃烧过程中释放大量有毒气体等性质限制了其应用。考虑到环境问题,本文以来源于生物质并且含有高磷含量(28 wt%)的植酸(PA)作为主要原料进行分子设计,通过静电自组装等方法制备了一系列氮磷型阻燃剂,并研究了这些阻燃剂对环氧树脂热性能及阻燃性能的影响。首先,通过植酸与含氮量高达41
近年来水体富营养化引起的藻类爆发性生长在世界范围内频繁发生,严重破坏水生态系统,影响水体景观与水产养殖,甚至危及人类健康。开发新型、高效、安全的藻华处理方法仍然是当前水环境保护领域的热点课题。低压电场针对低密度藻灭活处理,控制藻细胞快速生长,赋磁功能材料针对高密度藻捕获清除,治理藻华现场,上述高效、安全、简便的低密度控制高密度治理的方法为藻华处理提供了一种新的思路。本文研究局部增强电场处理(LEE
本文将重点探讨1977年到1980年,在中美关系正常化向前推进的背景下,美国卡特政府与中国政府通过接触、协商和谈判,最终签订中美科技合作协定,并且在制度的层面上建立中美科技合作关系的过程。同时,本文还将通过详细梳理中美两国在农业、能源、空间技术和教育文化领域的交流与合作来阐述中美科技合作关系的具体表现以及美国政府在其中的基本立场和跨部门合作机制。本文的主题分为5个部分。第一章论述中美科技合作的缘起
聚单硫代碳酸酯主链中硫原子的存在,使其具有优异的光学、电学、抗菌和重金属离子吸附等优异的性能,因而受到了研究者的广泛关注。近年来,高活性和高选择性催化体系的开发,使聚单硫代碳酸酯的合成取得了长足进步,同时主要的单体氧硫化碳已有多种低成本合成途径,其与基础化工原料环氧化物的共聚,使得聚单硫代碳酸酯具备了大规模工业化生产的可能,并有望成为一类新的通用聚合物材料。因此深入研究聚单硫代碳酸酯的结构与性能关
水中脱除有机物是化工分离领域的重要应用,其中发酵液中生物燃料浓缩(乙醇、丁醇等)和废水中挥发性有机物(VOCs)移除备受关注。渗透汽化与蒸汽渗透技术凭借其独特的分离机制、温和的运行条件,可同时利用相对挥发度和膜本身选择性实现高效分离,易与原料装置耦合实现“原位”分离而在众多分离技术中脱颖而出。设计合适的膜材料,膜结构及膜过程是实现高效分离的关键。本论文调控膜材料聚集态结构、亲疏水性以及膜过程,通过
辐射和纳米颗粒物是两类重要的环境污染,可能对组织器官造成急性或慢性损伤,危害人体健康。对这两类环境污染毒理学机制的探索有助于临床相关疾病的诊治,为健康安全防护措施的实施提供必要的理论依据。研究表明辐射及纳米颗粒主要通过凋亡、坏死、炎性响应等机制引发细胞毒性,损伤组织器官,影响人体健康。溶酶体损伤及活性氧释放分别是纳米颗粒物及辐射细胞毒性通路中关键的分子事件。近期研究则表明细胞铁死亡与这两个危害信号