【摘 要】
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醋酸甲孕酮(Medroxyprogesterone Acetate,MPA)是一种人工合成的激素,在畜牧生产中,曾被用作动物生长促进剂。由于醋酸甲孕酮有致乳腺癌的作用,我国和欧盟已禁止在动物性食品
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醋酸甲孕酮(Medroxyprogesterone Acetate,MPA)是一种人工合成的激素,在畜牧生产中,曾被用作动物生长促进剂。由于醋酸甲孕酮有致乳腺癌的作用,我国和欧盟已禁止在动物性食品生产中使用该药物。目前检测醋酸甲孕酮的方法主要有色谱法和ELISA法,但这些方法操作复杂,需要专门的仪器设备,不适合在现场进行快速检测。本研究旨在应用胶体金免疫层析原理,研制醋酸甲孕酮快速诊断试纸条。本文采用0-(羧甲基)羟胺法合成醋酸甲孕酮-3-(O-羧甲基)肟,琥珀酸酐法合成琥珀酰甲孕酮。研究发现,琥珀酰甲孕酮的合成需要24小时高温回流,且生成的产物量少;醋酸甲孕酮-3-(O-羧甲基)肟的合成只需在室温下搅拌3小时,且生成的产物量多。采用混合酸酐法和EDC法分别将醋酸甲孕酮-3-(O-羧甲基)肟与KLH和BSA偶联合成人工完全免疫原和包被抗原,紫外分光光度计鉴定表明偶联成功,并测得偶联比分别为2029:1和43:1。用MPS-KLH免疫三只新西兰家兔,获得抗MPA多克隆抗体,亲和纯化后,间接ELISA测定效价达到1:64000。采用竞争ELISA测定抗体与MPA的亲和性,结果表明MPA能与所得抗体特异性反应,且竞争性抑制结果明显。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,结果表明,加入还原剂后最
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