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肿瘤细胞通过血管获得营养,同时血管也为肿瘤转移提供通道。抑制肿瘤血管生成,可以在一定程度上抑制肿瘤生长和转移。血管内皮生长因子(VEGF)在调控血管生成中发挥重要作用,也是调节肿瘤血管生长及肿瘤细胞转移的关键因子。癌基因DEK在多种肿瘤中高表达,DEK过度表达与多种癌症的不良预后相关。目前DEK在调节肿瘤血管生成中的作用尚不明确。本研究探讨了癌基因DEK调控VEGF表达及在血管生成中的作用,为进一步深入研究DEK在肿瘤发生发展中的作用奠定实验基础。本研究包括以下内容:1.癌基因DEK对VEGF表达的影响及在调控血管生成中作用的研究通过荧光素酶活性、RT-PCR检测DEK对VEGF表达的影响,并观察DEK在HUVEC细胞生长、迁移及体外成管中的作用。利用鸡胚绒毛尿囊膜模型,观察DEK对体内血管形成的影响。结果表明:DEK激活VEGF的转录,增加VEGF表达,并促进HUVEC细胞的生长、迁移及体内、外血管生成。2.癌基因DEK通过VEGF影响血管内皮细胞的生物学活性研究利用VEGF中和性抗体封闭DEK过表达乳腺癌细胞ZR75-1分泌的VEGF,以其上清作为条件培养基培养HUVEC,观察DEK对HUVEC细胞的生长,迁移及体外血管生成的作用,并利用鸡胚绒毛尿囊膜模型,观察其对体内血管形成的影响。结果显示:DEK通过VEGF促进HUVEC细胞的生长、迁移及体内、外血管生成。3.癌基因DEK促进VEGF表达与HIF-1a相关性的研究在缺氧及敲低HIF-1a表达的条件下,检测DEK对VEGF表达的影响,并观察在敲低HIF-1a表达时,DEK对HUVEC细胞生物学活性的影响。结果表明:DEK部分依赖于HIF-1a促进HUVEC细胞的生长、迁移及体内、外血管生成。4.癌基因DEK调控VEGF分子机制的初步研究利用CHIP、EMSA寻找DEK与VEGF启动子的结合点,结果显示:DEK通过DRE和HRE募集于VEGF启动子,HIF-1a只募集于HRE调控VEGF的转录活性。5.癌基因DEK与HIF-1a的相互关系研究通过GST pull-down和免疫共沉淀确认DEK与HIF-1a的相互关系,结果表明:在生理条件下,DEK与HIF-1a存在相互作用。结论:1.癌基因DEK通过促进VEGF表达影响血管生成;2.癌基因DEK可与VEGF启动子结合,其对VEGF表达的调控部分依赖于缺氧诱导因子HIF-1a。