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目的:本实验在脑出血小鼠模型上应用HE、Western Blot、ELISA等方法,探讨破血化瘀、填精补髓中药汤剂是否通过调节Nrf2改善脑出血小鼠NF-κB炎性通路,改善脑出血后的继发性损伤。探索Nrf2是否为破血化瘀、填精补髓法治疗脑出血的靶点。方法:1.选取野生型C57雄性小鼠与Nrf2-/-雄性小鼠,体重22g~25g,随机分为假手术组(1组)、Nrf2-/-假手术组(2组)、脑出血模型组(3组)、Nrf2-/-脑出血模型组(4组)、出血性中风方剂组(5组)、Nrf2-/-出血性中风方剂组(6组),每组25只。采用自体血注射方法建立脑出血模型。2.通过神经行为学评分、干湿重法、HE染色法观察每组小鼠的神经功能缺损、脑含水量及血肿周围脑组织的病理情况。3.采用ELISA法检测血肿周围脑组织的IL-1、IL-6、TNF-α的表达变化。4.采用Western Blot法检测NF-κB、Nrf2的蛋白表达的变化。结果:1.手术前所有实验小鼠Longa评分为0分。1、2组假手术组术后没有神经功能障碍,活动正常。3、4组模型组与5、6组方剂组小鼠术后出现意识丧失、偏瘫、旋转等功能障碍。3组模型组行为学评分明显增加,与1组假手术组相比,有显著差异(P<0.05);5组方剂组行为学评分明显增加,与1组假手术组相比,有显著差异(P<0.05);3组模型组行为学评分与5组方剂组行为学评分相比有差异;3组模型组与4组模型组行为学评分相比较,无差异;4组模型组行为学评分显著增加,与2组假手术组相比较,有显著差异(P<0.05);6组方剂组行为学评分显著增加,与2组假手术组相比较,有显著差异(P<0.05);4组模型组行为学评分与6组方剂组行为学评分相比较,有差异;5组方剂组与6组方剂组行为学评分比较有显著性差异(P<0.05)。2.3组模型组脑含水量与1组假手术组脑含水量相比,有显著差异(P<0.05),5组方剂组脑含水量与1组假手术组脑含水量相比,有显著差异(P<0.05);3组模型组脑含水量与5组方剂组脑含水量相比,有差异;3组模型组与4组模型组小鼠脑含水量相比较无明显差异;4组模型组脑含水量与2组假手术组脑含水量比较,有显著差异(P<0.05);6组方剂组脑含水量与2组假手术组脑含水量相比,有显著差异(P<0.05);4组模型组与6组方剂组脑含水量相比较,有差异;5组与6组比较有显著性差异(P<0.05)。3.1组和2组假手术组:脑出血术后3d,鼠脑组织结构完整,细胞核染色清晰,神经细胞饱满致密,形态正常,排列整齐,无水肿。3组和4组模型组:脑出血术后3d,脑组织结构破坏明显,神经细胞坏死,血肿周围可见大量红细胞、中性粒细胞等炎性细胞浸润,脑组织疏松、淡染,细胞间隙明显增大,神经细胞数目减少,胶质细胞明显增多,排列紊乱、稀疏,脑组织水肿明显。5组和6组方剂组:脑出血术后3d,血肿周围可见炎性细胞浸润明显减轻,神经细胞略微肿胀,脑组织水肿较轻,神经细胞间隙趋于正常,细胞排列较为整齐。4.IL-1、IL-6、TNF-α表达水平3组模型组与1组假手术组相比,有显著性差异(P<0.05),5方剂组与1组假手术组相比,有显著差异(P<0.05);3组模型组与5组方剂组相比,有差异;3组与4组相比无显著性差异。4组模型组与2组假手术组相比,有显著性差异(P<0.05),6组方剂组与2组假手术组相比,有显著性差异(P<0.05);4组模型组与6组方剂组相比,有差异;5组与6组相比,有显著性差异(P<0.05)。结果提示破血化瘀、填精补髓法对脑出血的治疗可通过降低IL-1、IL-6、TNF-α水平发挥作用。5.脑出血后3d,Nrf2的蛋白表达量,3组模型组Nrf2含量与1组假手术组Nrf2含量相比明显增加,5组方剂组表达减弱。NF-κB的蛋白表达量,3组模型组NF-κB含量与1组假手术组NF-κB含量相比明显减少,5组方剂组NF-κB含量与3组模型组NF-κB含量相比明显增加,上述结果表明,破血化瘀、填精补髓法中药汤剂可以通过调节Nrf2调控NF-κB信号通路。结论:1.破血化瘀、填精补髓法可以促进Nrf2与NF-κB的表达,从而减轻继发性损伤,发挥脑保护的作用。2.破血化瘀、填精补髓中药汤剂可能是通过调节Nrf2改善脑出血小鼠NF-κB炎性通路的。