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【目的】研究非血缘异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后可供检测的供者特异性激活性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(activating killer cell immunoglobulin-like receptor,aKIR)基因的分布特征、比例和免疫重建规律,并在移植后动态检测表达供者特异性aKIR基因的临床意义。【方法】采用序列特异性引物聚合酶链反应(sequence specific primers PCR,PCR-SSP)方法对216对接受无关造血干细胞移植的供受者进行KIR基因分型。采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitation PCR,RT-qPCR)方法,动态检测86例患者移植后不同时间点供者特异性KIR基因mRNA的表达水平,定义为在所有血液有核细胞中,每10000个ABL基因中KIR的拷贝数,分析其重建规律,并结合临床随访资料分析检测表达供者特异性KIR基因的临床意义。【结果】⒈在非血缘allo-HSCT后表达供者特异性aKIR基因的分布特征及规律1)在216例患者接受非血缘allo-HSCT后可检测到供者特异性KIR基因为53.7%(116/216),在供受者KIR基因型不合中占78.3%(112/143),在供受者KIR基因型相合中占5.5%(4/73),且99.1%(115/116)含有供者特异性KIR中aKIR基因。2)在55对供者为KIR Bx基因型,而受者为KIR AA基因型中,可分别检测Bx1基因型中的KIR 3DS1、2DL5A、2DS5、2DS1;Bx2基因型中的KIR 3DS1、2DL5A、2DS3、2DS1;Bx3基因型中的KIR 2DS2、2DL2;Bx4基因型中的KIR 2DS2、2DL2、3DS1、2DL5A、2DS5、2DS1。3)在44对供者为KIR AA基因型,而受者为KIR AB基因型中,由于共有单倍型A,除有16对可检测供者特异性KIR2DS4(FUL完整型)外,其余均无供者特异性KIR可供移植后随访检测。4)在143对供受者KIR基因型不合中,可检测供者特异性aKIR基因频率由高到低分别为KIR 2DS1(35.7%)、3DS1(32.9%)、2DS5(29.4%)、2DS4(25.9%)、2DS2(24.5%)、2DS3(21.7%);可检测供者特异性抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulin-like receptor,iKIR)基因频率为KIR 2DL2(25.2%)、3DL1(8.4%)。⒉在非血缘allo-HSCT后供者特异性aKIR、iKIR基因的重建规律1)在供者特异性aKIR基因中2DS1、2DS2、2DS3、2DS4、2DS5、3DS1的mRNA表达水平:在移植当天、移植后1M、移植后2M、移植后3M时,2DS1基因mRNA表达水平分别为103.65、104.26、109.49、140.63;2DS2基因m RNA表达水平分别为64.17、118.87、163.85、281.72;2DS3基因mRNA表达水平分别为9.65、19.76、30.16、23.25;2DS4基因mRNA表达水平分别为100.42、191.95、193.97、311.49;2DS5基因mRNA表达水平分别为107.11、111.45、195.77、179.84;3DS1基因mRNA表达水平分别为2896.24、3612.32、5136.43、6905.50。2DS2、2DS3基因在移植后2M时的mRNA表达水平与移植当天供者相比具有统计学意义(P=0.026,0.022);2DS2、3DS1在移植后3M时mRNA表达水平与供者表达水平也存在统计学差异(P=0.032,0.039)。2)在供者特异性iKIR基因中2DL2、3DL1的mRNA表达水平:在移植当天、移植后1M、移植后2M、移植后3M时,2DL2基因mRNA表达水平分别为48.26、106.67、153.66、134.98;3DL1基因m RNA表达水平分别为627.50、2031.52、1461.85、1436.07。2DL2、3DL1基因在移植后1M的mRNA表达水平与移植当天供者相比具有统计学意义(P=0.027,P=0.035),且2DL2在移植后2M、3M时mRNA表达水平与移植当天供者表达水平均存在统计学差异(P=0.004,0.005)。3)在供者特异性aKIR基因中2DS1、2DS2、2DS4、3DS1在移植后3M,2DS3、2DS5在移植后2M时其m RNA表达超过供者移植当天的水平。同时具有供者特异性2DL2/2DS2基因分别在移植后2M和3M时mRNA表达超过供者移植当天的水平,3DL1/3DS1基因在移植后1M和3M时mRNA表达超过供者移植当天的水平。故供者特异性aKIR和iKIR基因在移植后均实现了免疫重建,但aKIR基因免疫重建时间晚于iKIR基因。3.在非血缘allo-HSCT后检测供者特异性aKIR基因表达的临床意义1)供受者HLA-10/10全相合移植后总体生存率高于供受者HLA≥7/10不全相合,供者为KIR Bx基因型的患者移植后总体生存率高于供者为KIR AA基因型,但差异均无统计学意义(P=0.126,P=0.592)。在86对HLA-10/10全相合中供者为KIR-AA基因型组aGVHD发生率高于KIR-Bx基因型组,分别为61.11%(11/18)、33.82%(23/68),差异有统计学意义(P=0.035)。2)在HLA-10/10全相合中,供者特异性KIR 2DS2、2DS3、2DS5基因在移植后2M、3M时其mRNA表达水平aGVHD组高于非aGVHD组;2DS4基因在移植后3M时aGVHD组高于非aGVHD组,但这些差异表达均无统计学意义。【结论】在非血缘allo-HSCT后可检测的供者特异性aKIR基因主要分布在供受者KIR基因型不合中,且在供者为KIR AA、Bx1、Bx2、Bx3、Bx4基因型中有较高的供者特异性aKIR基因。移植后供者特异性aKIR和i KIR基因呈现不同的免疫重建规律性,因此,在移植后动态检测供者特异性KIR基因可作为临床预测移植预后的新指标。