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随着癌症发病率的急剧增加,寻找有效治疗癌症的方法已经成为科研上和医学上一个急需解决的难题。目前,肺癌已经成为世界上死亡率最高的癌症类型,因此,能够快速找到肺癌治疗的有效方法已经成为所有人密切关注的事情。近年来,TRAIL(TNF-related apoposis-inducing ligand)及其受体介导的肿瘤细胞凋亡机制的研究已经成为热点。TRAIL受体(TRAIL receptor)属于肿瘤坏死因子受体超家族,通常主要包括4个成员:TNFRSF10A(Death Receptor 4,DR4),TNFRSF10B(DR5),TNFRSF10C(Decoy Receptor 1,DcR1),TNFRSF10D(Decoy Receptor 2,DcR2)。TRAIL受体通过胞内段的死亡结构域来完成细胞凋亡的发生。细胞膜上的死亡受体与配体TRAIL结合后引起三聚体化,受体分子胞内段与FADD及CASP8形成DISC复合体,顺序激活启动CASP8和效应CASP3,诱导细胞凋亡。YIPF2属于YIP1家族蛋白,具有316个氨基酸组成,它具有三个结构域:N端游离在胞质内、一个连续的五次跨膜基序、C端游离在腔内。YIPF2主要分布在内质网和高尔基体中。另外,IRE1α-XBP1途径是未折叠蛋白质应答反应(UPR)中一条比较保守的途径,其中,XBP1是一种X盒结合蛋白,它具有非剪切型(XBP1U)和剪切型(XBP1S)两种剪切体。在内质网应激(ER stress)中,IRE1α剪切XBP1U mRNA上的26个核苷酸,产生XBP1S,然后XBP1S会进入细胞核中发挥其转录因子的功能。实验室前期数据发现,在非小细胞肺癌细胞中,YIPF2可以调控TNFRSF10B引起细胞凋亡的发生。小分子化疗药物能够通过ER stress诱导细胞凋亡的发生,有趣的是,我们经过查阅数据库发现在YIPF2的启动子区存在XBP1S与其潜在的结合位点。基于以上,我们在非小细胞肺癌细胞中进行了如下四个方面的实验研究:(1)YIPF2促进ER stress诱导的细胞凋亡的发生。我们在细胞中过表达YIPF2,加入ER stress诱导剂TG或TM处理后,Western Blot结果发现,过表达YIPF2后,增强了 ER stress引起的细胞凋亡的发生,另外,我们利用流式细胞术实验检测TNFRSF10B在细胞膜表面的分布发现,过表达YIPF2促进TNFRSF10B在细胞膜的分布;敲低YIPF2后,加入TG或TM处理细胞,抑制了 ER stress引起的细胞凋亡,同时也抑制TNFRSF10B在细胞膜表面的分布。(2)YIPF2的升高与XBP1S有剂量和时间依赖性。我们在细胞中加入TG或TM处理细胞,Western Blot显示YIPF2与XBP1S的表达具有时间和剂量依赖性。(3)XBP1S在转录水平上促进YIPF2的表达。我们利用RT-PCR实验、萤火虫荧光素酶报告基因检测实验证明了 XBP1S在转录水平进行调控YIPF2的水平,从而促进了 YIPF2的表达。(4)XBP1S通过促进YIPF2的表达水平,从而调控TNFRSF1OB引起细胞凋亡的发生。我们在细胞中过表达XBP1S,加入TG或TM处理后,根据实验结果显示YIPF2及TNFRSF10B的水平有所升高,促进了 ER stress引起的细胞凋亡的发生;敲低XBP1S,加入TG或TM处理以后,发现YIPF2及TNFRSF10B的表达水平有所降低,抑制了 ER stress引起的细胞凋亡的产生。接下来我们通过回复实验验证了 XBP1S通过调控YIPF2引起TNFRSF10B水平的升高,从而引起细胞凋亡的发生。本研究为ER stress诱导的细胞凋亡提供了一个新的机理,也会为肺癌的诊治提供一个新的思路以及更好的治疗方案。