论文部分内容阅读
研究目的建立单纯高脂饮食诱导的IGT大鼠模型,在此基础上观察化瘀温胆汤对高脂诱导大鼠外观表现和医学病理特征的影响。阐明化瘀温胆汤改善I R和能量代谢的机制,为探寻其作用靶点提供实验依据。研究方法健康Wistar雄性大鼠,随机分两组,正常组给予普通饲料喂养,其余大鼠给予高脂饲料喂养,共持续20w,诱导IGT模型。观察大鼠外观表现,行IPGTT检测血糖,测定FPG及2hPG。模型复制成功后,随机分为模型组、中药组、西药组,中药组给予5.2g/kg·d化瘀温胆汤,西药组给予99 mg/kg·d二甲双胍溶液,正常组和模型组给予同体积生理盐水。连续灌胃给药4w。实验结束后,腹主动脉取血,分离血清,ELISA法检测Fins、G SP、ADPN、LEP,计算IAI、IRI,生化分析仪检测HDL-C、LDL-C。称取肝脏质量,计算肝脏指数。肝组织匀浆,检测TG、TC、LPO、GSH-Px水平。行肝脏糖原染色观察糖原储备情况,图像分析软件分析阳性目标面密度和平均灰度。Realtime PCR法检测肝脏AMPK信号通路中AMPKα、A CCα mRNA的表达。Western Blot法检测AMPKα、p-AMPKα、ACCα、p-ACCα蛋白的表达。研究结果1.血糖、血脂、胰岛素相关指标:化瘀温胆汤减轻体重,降低大鼠F PG、2hPG,与模型组比较有统计学意义(p<0.05或p<0.01),降低FPG存在时效性。化瘀温胆汤降低Fins、IRI、GSP水平,提高IAI水平,与模型组比较有统计学意义(p<0.05)。化瘀温胆汤提高血清HDL-C水平、降低L DL-C水平,与模型组比较有统计学意义O?<0.01)。2.细胞因子:化瘀温胆汤提高血清ADPN水平、降低LEP水平,与模型组比较有显著性差异(p<0.01)。3.肝脏糖脂代谢及氧化应激指标:化瘀温胆汤降低肝脏质量、肝脏指数,肝脏TG、TC水平,与模型组比较有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。化瘀温胆汤降低LPO水平,提高GSH-Px水平,与模型组比较有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。化瘀温胆汤提高阳性目标面密度和平均灰度值,与模型组比较有显著性差异(p<0.01),增加肝脏糖原储备。4.肝脏AMPK信号通路:化瘀温胆汤上调肝脏组织AMPKα mRNA表达,与模型组比较差异有统计学意义(p<0.05),对ACCα mRNA表达无影响(p>0.05)。化瘀温胆汤上调肝脏组织AMPKα、p-AMPKα、p-ACCα蛋白表达,与模型组比较有统计学意义(p<0.05或p<0.01),对ACCα蛋蛋表达无明显影响(p>0.05)。结论1.化瘀温胆汤能够降低模型大鼠血糖及血脂水平,纠正糖脂代谢紊乱,改善IR。2.化瘀温胆汤提高模型大鼠ADPN水平,降低LEP水平,改善能量代谢状态。3.化瘀温胆汤能够减轻模型大鼠肝脏脂肪沉积,改善氧化应激状态,增加肝脏糖原储备,起到保护肝脏作用。4.化瘀温胆汤能够提高模型大鼠肝脏AMPK活性,抑制ACC活性,发挥抑制脂肪合成,增加脂肪酸氧化,改善能量代谢状态,增加胰岛素敏感性作用。5.化瘀温胆汤影响模型大鼠肝脏AMPK-ACC信号通路,是其改善IGT IR的作用靶点之一。