rhEPO对新型BPD模型肺发育及肺Bcl-2、Caspase-9表达的影响及意义

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目的:(1)探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对新型支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型新生大鼠肺组织病理改变及肺Bcl-2、Caspase-9蛋白和mRNA表达的影响。(2)探讨磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路在重组人促红细胞生成素保护新型BPD中的作用。方法:定期受孕SD大鼠分别于孕第15天孕囊内注射脂多糖(LPS)或生理盐水(NS);予NS者新生鼠分为A、B、C组,分别予空气(氧浓度21%)、高氧、高氧+rh EPO处理,空气处理组为对照组;予LPS者新生鼠分为D、E、F组,分别予高氧、高氧+rhEPO及高氧+rhEPO+LY294002处理。高氧即给予60%高氧暴露;C、E、F组分别于高氧暴露第1天起,隔天背部皮下注射rhEPO(1 200 IU/kg),F组于注射rhEPO前30min背部皮下注射LY294002(0.3 mg/kg),共7次。于实验第1、7、14天每组随机选取8只处死。采用HE染色观察肺组织病理改变,RT-PCR和Western blot法检测肺组织中BCL-2、Caspase-9 mRNA和蛋白的表达。结果:B、D组新生大鼠肺组织发生明显病理改变,Caspase-9蛋白及mRNA表达增加,同时BCL-2蛋白及mRNA表达减少;C、E组肺组织病理变化明显改善,Caspase-9蛋白及mRNA表达减少,同时BCL-2蛋白及mRNA表达增加;F组与E组比较,前者病理改变要差,Caspase-9蛋白及m RNA表达明显增加,而BCL-2蛋白及mRNA表达明显减少。肺组织BCL-2、Caspase-9蛋白和mRNA的表达于实验第1、7、14天末各组间的差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:宫内炎性暴露和生后高氧干预均可引起支气管肺发育不良,同时可导致肺组织BCL-2、Caspase-9 mRNA和蛋白表达发生明显改变;rhEPO可明显减轻肺组织病理改变,增加BCL-2表达,同时减少Caspase-9表达,LY294002抑制PI3K活性后可明显降低rhEPO对新型BPD的保护作用,提示rhEPO可能通过减少肺细胞凋亡,最终改善肺发育,从而对新型BPD起一定的保护作用,其机制可能与PI3K/AKT信号转导通路有关。
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