研究目的:本研究通过建立D-半乳糖衰老大鼠模型,对二至丸中女贞子、墨旱莲进行分离提取,并对其活性部位进行鉴定,观察二至丸各活性部位对模型大鼠病理状态与组织中相关指标的影响,并对各项数据进行统计分析,以探究二至丸活性部位的抗衰老作用机制,为临床延缓衰老提供实验依据。研究方法:本实验采用回流法与大孔树脂吸附法对二至丸中女贞子及墨旱莲进行分离提取,分别提取出总黄酮、总三萜及总多糖活性部位,使用分光光度法鉴定各活性部位。实验前将SD大鼠随机分为7组,分别为空白组、模型组、二至丸水煎液组、黄酮组、三萜组、多糖组和活性部位合并组。实验前8周,除空白组外,其他各给药组以腹腔注射100mg/（kg·d）的D-半乳糖溶液来建立大鼠衰老模型,空白组给予等量的生理盐水。从第9周开始到第14周,对黄酮组、三萜组、多糖组和活性部位合并组大鼠给予制备好的相应实验药物进行干预。水煎液组给予相同比例浓度的二至丸水煎液,空白组与模型组则灌服生理盐水。第14周末,对大鼠进行行为学测试并记录相关数据,后禁食禁水,次日以水合氯醛麻醉大鼠,迅速取血、断头并提取实验所需的肝、脑及海马组织。采用ELISA测定大鼠肝脏中SOD、MDA含量、脑组织中MAO、LPF含量及脑海马区中P16、P21蛋白含量,PCR检测脑海马区缺失型mtDNA表达。通过检测上述各项指标,使用SPSS 25.0版统计软件对各实验组的数据进行处理比对,探究二至丸各给药组对衰老模型大鼠的抗衰老作用、机制及其与氧自由基-线粒体通路的相关性。研究结果:①二至丸及活性部位组均能改善模型大鼠的一般状态及学习记忆能力。②对大鼠SOD、MDA含量的影响:模型组大鼠的SOD明显下降,MDA明显上升,各给药组中SOD明显上升,MDA明显下降,具有统计学意义。③对大鼠MAO、LPF含量的影响:模型组大鼠的MAO、LPF明显上升,各给药组中MAO、LPF明显下降,具有统计学意义。④对大鼠P16、P21蛋白含量的影响:模型组大鼠的P16、P21蛋白明显上升,各给药组中P16、P21蛋白明显下降,具有统计学意义。⑤对大鼠线粒体DN A损伤的影响:模型组大鼠的mt-DN A缺失率明显上升,各给药组中mt-DNA缺失率明显下降,具有统计学意义。结论:1.二至丸活性部位初步分离出三萜类、黄酮类及多糖类等,并进行了鉴定。2.通过数据分析得出:二至丸活性部位能够改善衰老模型大鼠的一般状态和学习记忆能力,调节肝组织中的MDA、SOD含量、脑组织中的M AO、LPF含量、脑海马区P16、P21蛋白含量和mtDNA缺失程度,表明二至丸活性部位具有一定的抗衰老作用。3.通过数据分析,综合评估发现:二至丸活性部位与水煎液的抗衰老效果相当。其中在调节单胺氧化酶、P16蛋白与修复线粒体DNA损伤方面,活性部位合并给药组的效果优于水煎液组。4.二至丸活性部位可能通过提高机体抗氧化酶的活性,降低体内的自由基含量,调控海马区衰老蛋白表达及相关基因通路,改善脑神经递质系统,修复线粒体DNA的氧化损伤等途径而发挥抗衰老的作用。