口蹄疫病毒VP1基因及其免疫活性串联片段的表达

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该研究以五株国内分离的O型FMDV(分别命名为O/GD/L1/2000、O/GD/L2/98、O/GD/L3/2000、O/GD/L4/2000、O/GD/L5/2001,简称为L1、L2、L3、L4、L5)为研究目标,根据GenBank中注册的O型FMDV VP1基因的序列设计一对引物,采用RT-PCR方法成功地扩增出含有VP1全基因的cDNA片段,将5个cDNA片段分别克隆到pGEM-T Easy载体中进行序列测定,得到5个毒株VP1基因的序列.将VP1及其免疫活性串联片段在大肠杆菌中表达,表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,免疫豚鼠后可以产生高水平的保护性中和抗体,并能提供攻毒保护,为进一步研制FMD基因工程疫苗奠定了良好的基础;将表达的FA、FB融合蛋白纯化后作为诊断抗原,有望开发出一套敏感、特异、安全的FMDV抗体ELISA检测试剂盒,具有良好的应用前景.
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