本研究利用酶消化法结合柱层析法制备了绵羊红细胞表面活性蛋白CD58;用弗氏佐剂法和淋巴细胞吸附法免疫家兔;用方阵滴定法确定包被抗原最适工作浓度,检测抗血清,建立间接酶联免疫吸附法(ELISA),用间接ELISA测定所制备的抗体效价,并建立了检测山羊血清中CD58的间接竞争抑制性ELISA方法,检测了乏情期与发情期山羊血清中CD58的含量。获得以下结果:1.酶消化法结合柱层析法制备的绵羊红细胞表面活性蛋白CD58,玫瑰花环抑制试验检测结果抑制率为62.01±2.06%。SDS–PAGE显示制备的CD58提取物中,存在3种分子量大小的蛋白质。2.比较弗氏佐剂法和淋巴细胞吸附法2种免疫方法,淋巴细胞吸附法获得了针对CD58的特异性抗体,抗体效价达到1︰1×105,说明利用细胞表面受体与配体作用免疫动物,获取抗体的方式是可行的。3.建立了抗CD58抗体测定的间接ELISA方法。方阵滴定法确定包被原最适工作浓度为10.0μg/mL,最适包被液为pH 9.6,0.05 mol/L的CBS;辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG(酶标二抗)最适稀释倍数为l∶2 000,1.0%明胶封闭。重复性好,批间重复的变异系数(CV)2.48 % ~7.78 %。4.建立了测定山羊血清中CD58的间接竞争抑制性ELISA,线性范围20.0 ~ 500 000.0 ng/mL,回归方程Y = -0.207X + 1.159 (R2 = 0.988),该方法灵敏度为1.76 ng/mL。统计分析显示乏情期与发情期山羊血清中CD58含量差异显著(P﹤0.05)。试验证明,淋巴细胞吸附法与间接ELISA方法,制备CD58的特异性抗体和测定山羊血清中CD58含量是可行的,并利用间接ELISA方法测定了乏情期与发情期山羊血清中CD58含量,为进一步研究CD58在山羊不同生理时期的作用提供了理论依据。