目的：烧烫伤为生活中常见的意外伤害,中药烧烫伤制剂多为油剂,极性较大的有效成分难溶于油中,导致其中有效成分含量较低,未能满足临床需要。本课题采用微乳技术,以黄连、虎杖、茶油为药物组方,构建含有药材醇提物及茶油的微乳体系,并建立其质量评价方法,为开发安全、有效、使用方便的连杖微乳奠定基础。目前,中药微乳制剂的研究较少,且多为单一成分或有效部位制备成微乳,包含植物油及药材提取物的复方中药微乳鲜见报道。本课题以茶油、黄连提取物及虎杖提取物为药物处方,符合中药复方多成分、多靶点、多途径的用药特点,可为中药复方微乳制剂的研究提供参考。方法：1.建立表小檗碱、黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱一标多测的HPLC测定方法2.黄连油提工艺考察以黄连中四种生物碱为指标,考察油炸、油浸两种提取方式对黄连药材的提取效果及提取物在油中的溶解效果。3黄连虎杖提取物的中试制备及工艺保留率的跟踪3.1黄连中试工艺中指标成分保留率的测定：取合格黄连饮片15kg,按照文献工艺制备黄连提取物,依次取样第一次提取液、第二次提取液、浓缩液、喷雾干燥粉；测定其中的表小檗碱、黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱含量,计算工艺保留率。3.2虎杖中试工艺中指标成分保留率的测定：取合格黄连饮片15kg,按照文献工艺制备黄连提取物,依次取样第一次提取液、第二次提取液、浓缩液、喷雾干燥粉；测定其中大黄素与虎杖苷的含量,计算工艺保留率。4.连杖微乳的处方筛选以茶油作为微乳的油相；比较乳化剂EL-35、RH40、RH60、HS15、吐温80、OP对茶油的增溶作用及形成微乳的相区大小,优选乳化剂种类；以对盐酸小檗碱及虎杖苷的的溶解性能及形成微乳状况优选助乳化剂,确定乳化剂与助乳化剂的比例；考虑油相为药物组方,在微乳成型的基础上,选择油相较大的比例作为微乳处方比例。5.微乳的制备称取黄连浸膏粉,加入至1,2-丙二醇中,充分溶解后,微孔滤膜滤过,即得黄连丙二醇溶液,备用；称取虎杖浸膏粉,加入至1,2-丙二醇中,充分溶解后,微孔滤膜滤过,即得虎杖丙二醇溶液,备用；按比例称取黄连丙二醇溶液与虎杖丙二醇溶液,混合均匀,调节pH值,即得含药丙二醇,按处方比例加入茶油、EL35、含药丙二醇、水,75℃条件下,1400d/min搅拌20分钟,即得。6.连杖微乳的质量评价测定微乳中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱、虎杖苷的含量；以离心法、稀释法对连杖微乳进行鉴别；以激光粒度仪测定连杖微乳粒径大小及分布范围；以高低温实验考察微乳的初步稳定性；7.微乳的药效考察及安全性评价建立小鼠的烫伤模型,以烫伤小鼠伤口愈合率、死亡率、愈合时间为指标,考察连杖微乳的药效；以烫伤小鼠的生活状态、死亡状况、死亡动物剖检情况分别考察处方药物、丙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、空白微乳的毒副作用,评价微乳的安全性。结果：1.四种黄连生物碱分离度良好,专属性强。表小檗碱、黄连碱、巴马汀、盐酸小檗碱的塔板数分别为18370、18415、18613、16192,盐酸小檗碱在0.9253-9.2529μg范围内呈良好的线性关系。2.以油炸及油浸泡分别处理黄连药材及黄连提取物,以HPLC-UV法几乎检测不到油液中黄连生物碱,表明油提工艺及油剂难以保留黄连生物碱。3.黄连、虎杖中试工艺流畅、·可行。保留率计算以理论得粉计,黄连经提取—浓缩—喷干工艺,生物碱各指标成分的保留率为60%左右。虎杖经提取—浓缩—喷干工艺,大黄素的保留率为70%,虎杖苷的保留率为65%。4.处方筛选的最终结果为：微乳处方为茶油、EL35、丙二醇、水,比例为茶油：EL35：丙二醇：水=1：7：7：21(W:W:W:W)5.连杖微乳的质量评价连杖微乳含表小檗碱0.0431mg/ml、黄连碱0.0952mg/ml、巴马汀0.0674mg/ml、盐酸小檗碱0.339mg/ml,含虎杖苷0.33mg/ml,体系为澄清的红棕色o/w型微乳,平均粒径为30.9nm,高速离心试验、低温试验、高温试验均显示微乳依然澄清透明,稳定性良好。6.连杖微乳的药效及安全性考察以小鼠愈合率为指标,提示连杖微乳无促进伤口愈合的作用；且实验组小鼠死亡数量多于模型组死亡数量,提示连杖微乳对模型小鼠可能有毒副作用。分别考察制剂药物组、辅料组对烧伤模型小鼠的影响显示：与模型组比较,空白微乳组及丙二醇组有显著促进烫伤伤口愈合的作用,药物组有显著抑制烫伤伤口愈合的作用；空白微乳组与EL35组小鼠死亡数均多于模型组,提示需关注空白微乳及EL35对烧伤模型小鼠的的毒副作用。结论：1.黄连、虎杖药材经醇提后有效成分提取率较高,制备的微乳有效成分含量较高,质量稳定,构建了含有中等极性有效成分及低极性植物油的微乳体系。2.建立了连杖微乳的评价方法及小鼠烫伤模型,为烧、烫伤制剂的研究提供了参考。