两亲性复合蛋白由亲水性的类胶原蛋白(CLP)与疏水性的类弹性蛋白(ELP)融合而成。其中类弹性蛋白是一种应用非常广泛的结构蛋白,它是一段由人工合成结构类似于天然弹性蛋白的特殊多肽,由五肽(VPGXG)重复序列构成。而类胶原蛋白是一段由三肽(GXY)重复序列形成的一段具有特殊三螺旋结构的片段。本课题利用基因工程手段将类胶原蛋白与类弹性蛋白形成的两亲性复合蛋白载体用于修饰三种功能酶。因为类胶原蛋白自身在结构上具有特殊的三螺旋结构,因此这种融合蛋白能够通过其中的CLP片段进行自组装形成较好的形态,而其中的疏水性片段ELP则作为纯化标签。本课题分别利用超氧化物歧化酶(SOD)、D-氨基酸氧化酶(DAAO)和过氧化氢酶(CAT)与两亲性载体CLP-ELP通过基因工程手段融合得到六种融合蛋白。这些融合蛋白可以利用ELP所特有的可逆相变进行纯化,这种纯化方法简单、高效,并能得到目的条带单一的酶液。实验结果显示,融合蛋白SOD-CLP-ELP能够很好的自组装形成蛋白质微孔网络(PMN),而融合蛋白DAAO-CLP-ELP则能够很好的自组装形成蛋白质纳米多孔网络(PNN)。微米尺度的蛋白质微孔网络和纳米尺度的蛋白质纳米多孔网络更有利于酶的催化作用。圆二色谱结果显示融合后的功能酶大大减少了双氧水对其二级结构的影响。而荧光光谱也显示,融合酶在尿素条件下的稳定性也得到了很好改进。除了上述优点,在消除超氧自由基的能力上,SOD-CLP1-ELP6和SOD-CLP3-ELP6的酶活都有了一定的提高;DAAO-CLP1-ELP6和DAAO-CLP3-ELP6的酶活也比单独的DAAO酶活高。而融合酶CAT-CLP-ELP则在上述基础上进一步将得到的H202分解,构成无害的双酶连续催化反应体系。因此证明两亲性复合蛋白载体具有优良的修饰功能,不仅能够使结构更加的稳定,也能使酶的催化活性得到提高。