老鼠簕多糖的分离纯化及其抗氧化性研究

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红树是一种宝贵的药用植物资源,而老鼠簕是红树中比较重要的植物,其药用价值具有广阔的开发利用价值。本文首次对老鼠簕多糖的制备、结构以及抗氧化活性进行了研究,这对于进一步研究老鼠簕多糖结构与活性的关系,合理有效地开发利用红树资源具有重要的学术意义。本文主要研究内容如下:对老鼠簕多糖的提取和初步纯化工艺进行了研究,探讨了料液比、提取时间、提取温度和提取次数对老鼠簕多糖提取率的影响,并在单因素的基础上进行正交试验来确定最佳提取条件。结果表明多糖提取的最佳条件为料液比(树枝:水)1:35,90℃水浴提取2h,提取次数为3次,多糖提取率达到1.15%。使用不同树脂(D001,D301,D201,ADS-8)对老鼠簕粗多糖进行初步纯化,结果表明D301脱色脱蛋白效果最好。在不同pH值和温度下比较了D301的预处理效果,可将老鼠簕粗多糖纯度提高到35.6%。老鼠簕粗多糖经过三氯乙酸脱蛋白质杂质后,经DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sepharose CL-6B凝胶柱层析纯化,得到两种多糖:老鼠簕中性多糖和老鼠簕酸性多糖B组分。通过高效凝胶过滤色谱法、红外光谱和气相色谱等手段对老鼠簕中性多糖和老鼠簕酸性多糖B组分进行了初步的结构分析。老鼠簕中性多糖、老鼠簕酸性多糖B组分分子质量分别为11775、23161。红外光谱结构分析表明老鼠簕中性多糖、老鼠簕酸性多糖B组分具有多糖的特征吸收峰,并且其糖环为吡喃环。老鼠簕酸性多糖B组分是一种酸性果胶类杂多糖,糖醛酸含量为51.23%。气相色谱表明老鼠簕中性多糖主要由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,老鼠簕酸性多糖B组分中性单糖组成主要为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成。对老鼠簕粗多糖、老鼠簕中性多糖和老鼠簕酸性多糖B组分进行体外抗氧化试验,分别测定了老鼠簕粗多糖、老鼠簕中性多糖和老鼠簕酸性多糖B组分的还原力、在DPPH体系中的抗氧化性、清除超氧阴离子和羟基自由基能力。结果表明老鼠簕粗多糖和老鼠簕酸性多糖B组分具有较强的抗氧化性,老鼠簕中性多糖清除自由基能力比较弱。老鼠簕酸性多糖B组分在较低浓度就具有很强的清除自由基效果,在浓度为0.20mg/mL时可以除去DPPH体系中80%的自由基,对超氧阴离子自由基抑制率可以达到66.1%,老鼠簕酸性多糖B组分是老鼠簕粗多糖中最重要的抗氧化活性多糖成分。
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