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骨肉瘤是一种少见的骨原发恶性肿瘤,早期肺转移、临床预后差是骨肉瘤的特点,也是影响患者生存率的重要因素。microRNA是一种具有转录后调控作用的小分子RNA,具有多种生理功能,参与多种恶性肿瘤增殖、转移的调控。研究发现,miR-29家族中的miR-29c在多种恶性肿瘤中表达下调,并验证其对多种恶性肿瘤的转移和增殖起到抑制作用,前期实验证实mi R-29c在骨肉瘤组织和细胞系中异常表达,提示其可能参与了骨肉瘤的增殖和转移。目的:验证miR-29c在骨肉瘤组织中的异常表达和不同侵袭能力骨肉瘤细胞系中的差异表达;探究miR-29c对骨肉瘤细胞系增殖、侵袭和迁移能力的影响,为骨肉瘤的分子靶向治疗提供理论基础。方法:1.采用实时定量PCR检测68例骨肉瘤、正常组织标本miR-29c的表达;用此法检测SOSP-9607骨肉瘤细胞系的两组侵袭性不同的细胞亚系F5M2和F4中miR-29c的表达。2.采用Lipofectamine2000脂质体法分别将miR-29c mimics和inhibitor瞬时转染入sosp-9607的两个细胞亚系,构建mir-29c高表达、低表达骨肉瘤细胞模型。3.对所构建的细胞模型进行肿瘤细胞功能实验,包括transwell侵袭和迁移实验、mtt法检测肿瘤细胞增殖曲线;流式细胞仪法检测肿瘤细胞周期和凋亡比例。结果:1.骨肉瘤组织mir-29c表达明显低于瘤旁正常组织;高侵袭性f5m2骨肉瘤细胞系mir-29c表达明显低于低侵袭性f4骨肉瘤细胞系。2.用lipofectamine2000脂质体分别将mir-29cmimics和inhibitor成功转入f5m2骨肉瘤细胞系和f4骨肉瘤细胞系。rt-pcr结果验证f5m2/29cmimics细胞中mir-29c表达增加;f4/29cinhibitor细胞通过rt-pcr间接验证其靶基因的表达,证明f4骨肉瘤细胞mir-29c下调成功。3.transwell细胞侵袭和迁移实验显示,mir-29c上调的骨肉瘤细胞f5m2侵袭和迁移能力较对照组均明显下降;mir-29c下调的骨肉瘤细胞f4侵袭和迁移能力较对照组明显提升。mtt细胞增殖实验显示,mir-29c上调的骨肉瘤细胞f5m2增殖能力较对照组减弱,细胞增殖曲线下移;mir-29c下调的骨肉瘤细胞f4增殖能力较对照组增强,细胞增殖曲线上移。4.流式细胞仪细胞周期和细胞凋亡实验显示,mir-29c上调的骨肉瘤细胞f5m2与对照组相比,各周期肿瘤细胞比例无明显差异,凋亡细胞比例也无明显差异;mir-29c下调的骨肉瘤细胞f4与对照组相比,各周期肿瘤细胞比例亦无明显差异,凋亡细胞比例无统计学差异。结论:1.mir-29c骨肉瘤组织中表达含量下调,且高侵袭性骨肉瘤细胞mir-29c表达含量低于低侵袭性骨肉瘤细胞系,提示mir-29c与肿瘤侵袭能力呈负相关,mir-29c可能参与了骨肉瘤细胞的增殖和转移能力的调控。2.通过构建mir-29c上、下调肿瘤细胞模型,验证了mir-29c对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的抑制作用,为下一步研究mir-29c抑制骨肉瘤细胞增殖和转移的分子机制研究打下基础3.mir-29c对骨肉瘤细胞系sosp9607的细胞周期和凋亡无明显影响,mir-29c对肿瘤细胞周期和凋亡的作用可能具有组织特异性。