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背景大鼠是常用的实验研究动物,但由于体型小,口腔狭窄,暴露声门难度大,大鼠气管插管一直是个难题。文献报道的大鼠气管插管方法主要有:气管切开插管法,盲插法,直视下插管法。既往的方法都它的局限性,容易出现插管失败和并发症。因此,有必要寻求一种新的插管方法,实现安全、准确的大鼠气管插管。我们利用气管导管内置入直径为0.9mm的光纤作为光源和导丝,建立一种新型大鼠气管插管方法。复苏后心功能不全主要表现为低血压、休克、致命性的室性心律失常或再次发生心跳停搏,是心脏骤停患者复苏后早期死亡的首要原因。约60%-70%成功复苏后的患者因出现低血压、休克或致命性室性心律失常而于24h内死亡,最终只有4.5%能存活出院。复苏后心功能不全主要归因于心脏骤停期间处于的全心缺血状态以及再灌注后所致的心肌损伤。促红细胞生成素(erythropoietin , Epo)是分子量为34KDa的糖蛋白类激素,主要作用于红系祖细胞,调节血循环中的红细胞容积。最近发现,Epo能在缺血再灌注中发挥广泛的组织保护作用,包括心脏、大脑、视网膜、肾脏、肝脏和皮肤等。在心肌缺血再灌注实验研究中, Epo能减少心肌梗死面积和减轻缺血再灌注损伤,改善心功能。基于缺血再灌注损伤是复苏后机体的主要病理生理过程。在心肺复苏期间给予Epo,有望发挥心肌保护作用,改善复苏后心功能。第一部分大鼠新型气管插管方法的建立1.研究目的利用气管导管内置入直径为0.9mm的光纤作为光源,建立一种新型的大鼠经口气管插管方法。2.研究方法将Sprague-Dawley大鼠分为2组(n=40):ⅰ)传统光源直视下的经口气管插管组(简称传统直视组n=20),ⅱ)气管导管内置入光纤引导下的经口气管插管组(简称光纤引导组n=20)。比较两组间的经口气管插管时间、插管次数、一次插管成功率。将上述经口气管插管的大鼠,与小型动物呼吸机连接,调整呼吸频率(60次/分)和潮气量(0.65ml/100g),持续通气60min后拔除气管插管,并比较拔除气管插管后1周的存活率。3.结果3. 1光纤引导组的经口气管插管时间和插管次数[(36.00±16.43)s和(1.05±0.22)],均较传统直视组明显减少([86.20±56.48)s和(1.75±1.02)],(P<0.01)。3. 2光纤引导组的经口气管插管一次成功率(95%)高于传统直视组(60%)(P<0.05)。3. 3光纤引导组拔除气管插管后的1周存活率(100%)高于传统直视组(80%);但其差异无统计学意义(P>0.05)。4.结论气管导管内光纤引导下的经口气管插管法是一种创新的大鼠气管插管方法,能实现快速、有效、准确的气管插管,值得推广应用。第二部分促红细胞生成素对心肺复苏后心肌的影响1.研究目的观察窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏后的心功能和心肌损伤的情况;探讨促红细胞生成素对大鼠心肺复苏后的心肌保护作用。2.研究方法夹闭气管8min ,建立窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏动物模型。Sprague-Dawley大鼠(n=24),随机分为3组:ⅰ)正常对照组(n=8):进行气管插管、血管置管,不予夹闭气管和心肺复苏。ⅱ)常规心肺复苏(CPR)组(n=8):夹闭气管8min后,进行胸外按压、机械通气和肾上腺素0.02mg/kg,于恢复自主循环(ROSC)后3min经股静脉推注0.9%NaCl 0.5ml。ⅲ)Epo治疗组(n=8):夹闭气管8min后,进行胸外按压、机械通气和肾上腺素0.02mg/kg,于ROSC后3min,将Epo5000U/kg与0.9%NaCl稀释成0.5ml后,注入股静脉。所有大鼠经右颈总动脉逆行插管至左心室和股动脉插管,持续监测心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升和下降最大变化速率(±dp/dtmax )和标准II导联心电图,肛门插入内置式温度探头记录深部直肠温度,用加热灯保持体温在36. 5±0. 5℃。于观察终点(ROSC后120min),采集血样测定血清CTnI含量,取出心脏,光镜和透射电镜观察心肌组织的损伤情况。3.结果3. 1三组间基线水平的HR、MAP、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax无显著性差异(P> 0.05)。3. 2常规CPR组和Epo治疗组大鼠自主循环复苏后(ROSC)30min、60min、90min、120min的HR、MAP、LVSP和±dp/dtmax均正常对照组明显下降(P < 0.01),ROSC120min的LVEDP较正常对照组明显升高(P < 0.01)。3. 3常规CPR组ROSC后120min血清CTnI水平较正常对照组明显升高(P < 0.01);常规CPR组出现心肌细胞水肿变性、坏死、炎症细胞浸润,以及胞膜完整性丧失、线粒体肿胀、嵴断裂、溶解等心肌组织的损伤性改变。3.4 Epo治疗组ROSC后30min、60min、90min、120min的LVSP(P<0.05)、±dp/dtmax(P< 0.01)较常规CPR组明显升高,ROSC120min的LVEDP较常规CPR组降低(P < 0.01),两组间的HR和MAP无显著性差异(P> 0.05)。3.5同组内不同时间点比较显示,正常对照组的各项血流动力学指标无显著性差异(P> 0.05),常规CPR组和Epo治疗组ROSC30 min、60min、90min、120min的HR、MAP、LVSP和±dp/dtmax较各自的基线水平明显下降(P<0.01);ROSC120min的LVEDP较各自的基线水平显著升高(P<0.01),而常规CPR组和Epo治疗组ROSC30 min、60min、90min、120min之间无显著性差异(P>0.05)。3.6 Epo治疗组与常规CPR组ROSC后120min血清CTnI水平比较无显著性差异(P> 0.05);心肌组织的病理学结构和超微结构的损伤性改变较常规CPR组减轻。4.结论4.1窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏成功后存在心功能不全和心肌损伤。4.2 Epo可以改善窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏成功后的心功能和减轻心肌损伤。全文结论1.气管导管内光纤引导下的经口气管插管法是一种创新的大鼠气管插管方法,能实现快速、有效、准确的气管插管,值得推广应用。2.窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏成功后存在心功能不全和心肌损伤。3. Epo能改善窒息性大鼠心脏骤停-心肺复苏后的心功能和减轻心肌细胞损伤,对复苏后心肌具有保护作用。