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丙酮酸脱氢酶系或丙酮酸脱氢酶复合体（PDHc）是催化丙酮酸氧化脱羧生成乙酰-CoA代谢过程中起着关键的作用的一种酶系。丙酮酸脱氢酶活性的测定在丙酮酸脱氢酶系的性质、基因克隆、分离、纯化、鉴定及相关研究中都是必不可少的；对于研究丙酮酸脱氢酶系的结构与性质、分离、纯化及鉴定具有重要的理论意义；同时对于研究与丙酮酸的代谢异常有关的疾病，以酮酸脱氢酶系为靶标的除草剂和杀菌剂的筛选与开发也具有重要的现实意义。目前已有报导的丙酮酸脱氢酶系活性测定方法几乎都是二十世纪五六十年代就发展起来的。根据使用的手段可分为放射性同位素标记法和分光光度法。同位素标记法主要用于粗酶液，是基于14C丙酮酸经过E1（PDH）的催化作用转CO2，可以通过测定14C标记的CO2生成量来决定E1酶的活性。分光光度法有测定丙酮酸脱氢酶复合体活性的还原型辅酶Ⅰ法、碘硝基四唑紫法，测定丙酮酸脱氢酶复合体中E1酶活性的2，6-二氯吲哚酚法和铁氰化钾法。同位素标记法是采用动态的测量，没有分光光度法便利，同时它还用到一种相对不稳定的放射性物质，易造成环境污染。所以本研究重点放在对测定该酶的分光光度法的研究上，通过采用同一种测活方法测定不同来源的丙酮酸脱氢酶的酶活性，或者用不同的测活方法测定同一种丙酮酸脱氢酶的酶活性等实验手段，对常用的几种分光光度法的灵敏度，干扰因素等方面进行了比较性的研究，同时也开创性的发明了一种新的测活方法。研究发现：常用测定丙酮酸脱氢酶活性的方法中：铁氰化钾法的灵敏度极低；2，6-二氯吲哚酚法灵敏度较高，但易受到疏基保护剂的影响。测定还原型辅酶Ⅰ（NADH）形成速率的标准分光光度法常被用于纯化的丙酮酸脱氢酶复合体活性的测定，这种方法由于易受到丙酮酸脱氢酶复合体反应产物的副反馈抑制而受到限制，且试剂价格昂贵。1981年Hinman LM等人报道了一种在粗的均质液中测定丙酮酸脱氢酶复合体活性的分光光度计法方法，此方法被用于测定粗的均质液和线粒体制备后的丙酮酸脱氢酶酶活性的测定。经过本研究发现：本应该与丙酮酸脱氢酶复合体中三个酶的共同产物NADH反应的碘硝基四唑紫，不仅能与NADH反应，它同时也能与丙酮酸脱氢酶复合体中第一个酶丙酮酸脱氢酶（E1）的产物直接发生作用；这种方法也易受到疏基保护剂的影响，所以这种方法测定丙酮酸脱氢酶复合体的可靠性值得进一步商榷。由于现有的方法在测定丙酮酸脱氢酶系活性时不同程度的存在着这样那样的缺点，所以本研究在对丙酮酸脱氢酶系的测活方法系统研究基础上，建立了一种新的、经济有效的测活方法。该方法的原理是基于偶连丙酮酸脱氢酶复合体中E1的产物对噻唑蓝（MTT）的还原，使最大吸收峰从420nm（黄色）左右红移到570nm（蓝色）左右。噻唑蓝的作用是作为电子受体。结果显示：这种方法所用的试剂比较经济，灵敏度比2，6-DCPIP法和铁氰化钾法高，同时它稳定性好，克服了2，6-DCPIP法易受疏基保护剂影响，不利于测定丙酮酸脱氢酶复合体中E1的活性的缺点，它既适用于纯化的PDH也适用于来自线粒体的提取后的PDHc中的PDH（E1），也适用于一定在粗酶液。