壳聚糖是天然阳离子多糖,生物相容性好、可生物降解,具有止血、抗菌以及促进组织修复等生物学活性,在医药材料、组织工程等领域中应用广泛。将壳聚糖纳米化后不仅可以改善它的溶解性,还有助于增强生物活性。离子凝胶法(IGT)为制备壳聚糖纳米粒常用方法,但通常该方法制备的纳米粒粒径分布不均匀,长时间放置易发生沉降聚集,影响纳米粒制剂的稳定性。本研究建立了壳聚糖纳米粒的复合制备方法(ICH),并研究了壳聚糖纳米粒的表征、稳定性和抑菌活性。结果如下:1.复合法(ICH)制备的壳聚糖纳米粒微观形态呈现规整的球状,均匀性较好,可以显著改善离子凝胶法(IGT)制备的壳聚糖纳米粒的不规整形态。2.通过高压匀质制备参数优化,ICH法制备的壳聚糖纳米粒平均粒径可达到180-250 nm,电位为25-35 mV,低于IGT法制备的壳聚糖纳米粒。提示ICH制得的纳米粒有较小的平均粒径和较低的电位。电位均在30 mV左右,有较好的稳定性。3.通过相关药用高分子的处方优化,可以进一步增强ICH法制备的壳聚糖纳米粒的稳定性。当P-188、PEG-1500、P-407和HP-β-CD的浓度分别为1.0、0.8、1.0和1.0 g/L时,在4 ℃下静置一个月,纳米粒粒径和电位未见显著改变,显示ICH复合法制备的壳聚糖纳米粒具有较好的制剂应用潜力。4.将ICH复合法制备的壳聚糖纳米粒用于制备温敏凝胶,通过处方优化,使温敏凝胶的pH接近中性,具有可调控的胶凝温度(25-45 ℃)、胶凝时间(30-120 s)以及较好的稳定性。5.ICH复合法制备的壳聚糖纳米粒具有较好抑菌效果。采用白色念珠菌为实验菌,硝酸咪康唑(100 μg/mL)为阳性对照,ICH复合法制备的壳聚糖纳米粒及温敏凝胶的抑菌直径为21.6±0.5 mm,明显大于离子凝胶法制得的壳聚糖纳米粒的抑菌直径(17.2±0.2mm)。综上所述,本研究建立的壳聚糖纳米粒的复合制备方法有助于改善壳聚糖纳米粒的粒径、电位、稳定性和抑菌效果,显著优于离子凝胶法,具有制剂产品的应用前景。