EMS和秋水仙素对寒兰根状茎化学诱变的研究

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以甲基磺酸乙酯(EMS)和秋水仙素(colchicine)为诱变剂,以寒兰(Cymbidium kanran Makino)根状茎为材料,探讨2种诱变剂对寒兰根状茎生长的影响,筛选出半致死剂量,并分析了2种诱变剂对根状茎的生理、分子水平上的诱变效应,结果表明:1、2种化学诱变剂对寒兰根状茎的生长均有一定的抑制作用,随着浓度升高或时间的延长,根状茎的褐化率和死亡率升高,褐化率始终小于死亡率。总体表现为根状茎早期生长缓慢,先出现褐化现象,后逐渐导致根状茎死亡。2、计算了2种诱变剂对寒兰根状茎的半致死剂量,它与浓度和时间都有关系,可作为寒兰离体化学诱变的参考剂量。秋水仙素1d、2d、3d、4d的半致死剂量分别为1.05%、0.81%、0.59%和0.38%;EMS1d、2d、3d、4d的半致死剂量分别为0.607%、0.237%、0.145%和0.119%。可见,EMS对根状茎的致死率影响高于秋水仙素。3、经2种诱变剂处理后,根状茎可溶性糖含量与对照组相比均有不同程度的增加,且达到显著性差异,随着2种诱变剂浓度的增加和时间延长而升高。随着EMS浓度的增加和时间延长,可溶性蛋白含量呈现出先升高后降低的趋势,与对照组具有显著性差异;随着秋水仙素浓度的增加和时间延长,可溶性蛋白含量都有降低,但变化不明显,仅比对照减少了7.84%-20.2%,没有统计学意义上的差异。4、经2种诱变剂处理后,根状茎MDA含量与对照组相比均有不同程度的增加,呈现出先升高后降低并趋于稳定的趋势。经过不同浓度的EMS和秋水仙素诱变处理后,根状茎的H202含量与对照相比均有不同程度的增加,总体上是随着浓度的增加而增大。经过不同时间的EMS和秋水仙素诱变处理后,随着时间的延长,H202含量出现先上升后降低趋势。5、经2种诱变剂处理后,根状茎的SOD、POD活性与对照组相比均有不同程度的增加。随着EMS浓度的增加、时间的延长,SOD、POD活性出现先上升后降低的趋势。随着秋水仙素浓度的增加、时间的延长,SOD、POD、CAT活性出现逐渐上升的趋势。6、诱变后的根状茎和对照之间的基因组ISSR扩增图谱条带均有差异性,EMS多态性条带比例为25%,秋水仙素无多态性条带。
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