大熊猫消化道正常菌群的分离鉴定及药敏性研究

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无菌采集健康大熊猫的新鲜粪便,分别接种于新鲜肉汤和厌氧肉肝汤内,37℃培养24~48 h。将液体培养物稀释到同一梯度,定量接种于固体培养基上(绵羊血琼脂平板和特殊培养基),分别进行需氧和厌氧培养24~48 h。根据培养基上的不同类细菌进行分离挑纯及显微镜观察,初步确定了G+芽孢杆菌、G+无芽孢杆菌、G+球菌及G-杆菌。然后分别对纯培养物进行生化试验,包括需氧性鉴定、M.R与V-P、接触酶试验、明胶试验、硝酸盐还原试验、吲哚试验、糖醇发酵试验、柠檬酸盐利用试验、嗜盐性试验等,结果从大熊猫粪便中分离鉴定了12种细菌,依次为鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、多粘芽孢杆菌、耐久肠球菌、两歧双歧杆菌、四联消化链球菌、稍变棒杆菌、面包乳杆菌、大肠埃希氏菌、变形杆菌、奇异菌、梭菌。之后进行了毒性试验和药敏试验,毒性试验结果显示四联消化链球菌、鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、耐久肠球菌、两歧双歧杆菌对小白鼠无致病性,而奇异菌及多粘芽孢杆菌使小白鼠死亡。用26种抗生素对选择出的8种杆菌进行药敏试验,筛选出了对大肠杆菌高敏及对乳酸菌低敏的抗生素为阿米卡星;用试管2倍稀释法确定出阿米卡星对大肠杆菌的MIC和MBC分别为16ug/ml和32ug/ml;在阿米卡星MIC下与大肠杆菌共培养后发现大肠杆菌对阿米卡星、复方新诺明、氟哌酸、先锋噻肟均由高敏变为低敏,对林可霉素由耐药变为低敏,对青霉素由低敏变为耐药;在阿米卡星MBC下与大肠杆菌共培养发现大肠杆菌在阿米卡星中的存活曲线表现为先下降后上升。
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