【摘 要】
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半夏为天南星科植物半夏(Pinellia ternata(Thunb).Breit.)的干燥块茎,具有镇咳、祛痰、止呕等作用。目前,有研究报道其生品是有毒的,主要表现为强烈的黏膜刺激性(胃、肠道及咽喉)和肝脏损伤,因此半夏生品多外用,临床上以炮制品(清半夏、姜半夏和法半夏)为主。半夏不同炮制品毒性不同,其根源是半夏炮制前后物质基础发生的物理和化学变化。因此,本文从半夏刺激性成分与毒性成分的两方面阐
【基金项目】
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林业公益性行业科研专项(201504701)
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半夏为天南星科植物半夏(Pinellia ternata(Thunb).Breit.)的干燥块茎,具有镇咳、祛痰、止呕等作用。目前,有研究报道其生品是有毒的,主要表现为强烈的黏膜刺激性(胃、肠道及咽喉)和肝脏损伤,因此半夏生品多外用,临床上以炮制品(清半夏、姜半夏和法半夏)为主。半夏不同炮制品毒性不同,其根源是半夏炮制前后物质基础发生的物理和化学变化。因此,本文从半夏刺激性成分与毒性成分的两方面阐述,考察半夏不同炮制品中草酸钙针晶的数量、长度、钝圆率与家兔眼刺激性的相关性以及半夏不同炮制品中潜在毒性成分的含量与大鼠肝毒性的相关性进行了研究。主要研究内容与结果如下:1.采用家兔眼结膜刺激模型,考察半夏不同炮制品提取的草酸钙针晶的刺激性作用,探究草酸钙针晶的数量、长度、钝圆率与家兔眼结膜刺激的相关性。结果表明,半夏炮制品较生半夏中的草酸钙针晶而言,其数量明显减少,长度明显变短,草酸钙针晶尖端发生了溶解变得钝圆,半夏及其炮制品较生半夏的家兔眼刺激降低。草酸钙针晶的数量、长度、钝圆率与刺激性毒性均具有良好的线性相关关系,草酸钙针晶数量变少、长度变短、钝圆率增加都是减弱了草酸钙针晶对细胞的破坏能力,因此草酸钙针晶的刺激性毒性是三个因素共同作用的结果。2.通过查阅文献筛选出溶血磷脂酰胆碱、盐酸麻黄碱、葫芦巴碱、胆碱、原儿茶酸、原儿茶醛、尿黑酸和大黄酚8种成分可能为半夏潜在的致肝毒性成分。采用UPLC-MS/MS建立同时测定半夏不同炮制品中8种潜在毒性成分含量的方法,并对其含量进行分析。结果表明,生半夏经不同方法炮制后,这8种潜在毒性成分含量均有不同程度变化。与生半夏相比,清半夏、姜半夏、法半夏中溶血磷脂酰胆碱、胆碱、葫芦巴碱、盐酸麻黄碱、原儿茶酸和大黄酚的含量均降低,姜半夏、清半夏中原儿茶醛的含量升高,姜半夏、清半夏、法半夏中尿黑酸含量升高,说明尿黑酸和原儿茶醛可能不是半夏中存在的毒性成分。3.对正常SD大鼠灌胃给予9 g/kg剂量的生半夏、法半夏、清半夏、姜半夏水提液,连续给药3d后,测定大鼠肝功能相关指标(ALT、AST、TBA、TBIL、AKP、IL-18、IL-1β、NLRP3、TNF-α)的水平,并对肝脏进行组织病理检查。结果表明,与空白组比较,生半夏组ALT、AST、TBA、TBIL、AKP水平均显著升高(p<0.01),TNF-α水平略升高(p<0.05),而对IL-18、IL-1β、NLRP3水平无明显影响(p>0.05)。通过病理检测可看出,与空白组相比,半夏及其炮制品均对大鼠肝组织造成损伤,其中生半夏肝毒性最大,半夏炮制之后肝毒性减弱。在9 g/kg剂量下生半夏、姜半夏、法半夏和清半夏对正常大鼠造成不同程度的肝损伤,(生半夏>清半夏>姜半夏>法半夏)说明炮制对半夏有减毒之效。4.将半夏炮制前后的8种潜在毒性成分含量进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析,结果表明,胆碱、盐酸麻黄碱和原儿茶酸三种成分是对半夏生品及其炮制品差异贡献最大的指标性成分,也可能是半夏炮制后毒性降低的相关成分。将炮制前后的肝毒性指标与8种潜在毒性成分含量进行相关性分析,探讨半夏不同炮制品与8种潜在毒性成分含量及肝毒性之间的关系,结果表明,初步推测溶血磷脂酰胆碱、葫芦巴碱、盐酸麻黄碱、大黄酚、胆碱和原儿茶酸的共同作用导致正常大鼠的肝毒性。
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