牛成纤维细胞系的建立、体外受精及核移植的研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:bltong861
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本实验重点是在新建胚胎实验室建立牛成纤维细胞培养技术体系和核移植技术体系,完善和熟化体外受精技术体系。并为优秀公牛遗传资源的保存,试管牛和廉价胚胎生产以及转基因牛的研究打下基础。研究结果表明: 1.采用组织块贴壁法建立了优秀奶牛种公牛耳组织成纤维细胞系。细胞冻存代数在3-4代,冻存密度达到1×106个/ml以上:复苏后细胞存活率不存在差异,均保持在90%以上;成纤维细胞生长曲线呈“S”型;细胞系微生物检测结果均为阴性,未受到细菌和支原体污染。 2.完善与熟化了牛体外受精技术体系。采集卵母细胞547枚,进行受精胚胎和孤雌胚胎的发育及发育速度的比较。体外受精卵的卵裂率(69.8%)、8细胞率(47.3%)和囊胚率(26.1%)低于对照组孤雌胚胎的卵裂率(73.0%)、8细胞率(49.2%)和囊胚率(32.6%)。二者的胚胎发育都在第6d开始有囊胚出现,集中在第6d、7d和8d。而且实验发现,卵丘-卵母细胞复合体中的卵丘细胞能将体外受精胚胎囊胚发育率由10.2%提高到27.5%,在培养液中添加Vero细胞,能将体外受精胚胎囊胚发育率由12.4%提高到27.5%,卵丘-卵母细胞复合体中的卵丘细胞及以Vero细胞作为饲养层细胞能明显提高体外受精胚胎囊胚发育率。 3.建立了牛体细胞核移植技术体系。牛体细胞核移植的卵裂率(72.4%)、8细胞率(38.8%)和囊胚发育率(11.2%)低于对照组卵母细胞孤雌激活的卵裂率(78.8%)、8细胞率(55.3%)囊胚发育率(34.9%)。两组的卵裂率无显著差异,但8细胞率和囊胚发育率的差异显著。在培养液中添加Vero细胞,能将克隆胚胎囊胚发育率由0%提高到11.2%,明显提高胚胎囊胚发育率,能够为实验室提供可移植的胚胎。
其他文献
SHP—1和SHP—2都属于非受体样的蛋白酪氨酸磷酸酶,在细胞磷酸化调控的信号转导途径中起着非常重要的作用。尽管SHP—1和SHP—2在基因序列上有55%的同源性,SHP—1/SHP—2在机体
本研究以哈尔滨白兔、天府黑兔、比利时兔、齐卡巨型兔以及加利福尼亚兔共5个肉兔品种220个体为实验材料,采用克隆测序技术,首次测定了兔黑素皮质素受体4(MC4R)基因编码区大部
在小学语文教学中,培养学生好的写字习惯,有利于促进学生意志力的提升,有利于培养学生的耐心、细心,有利于陶冶学生的情操、培养审美情趣.因此,小学语文教师应当充分发挥自身
单元整合教学就是根据一个单元的内容提炼出一个主题,然后围绕这一主题确立教学目标,设计教学策略,搭建教学平台,开展教学活动,一步步引领学生走向文本,探究课文内容,使学生
教育问题一直是社会各界广泛关注的热点问题,我国对教育极其重视,且对教育投入了大量的资源.本文就是以创设情境教学法在小学语文教学中的应用为研究中心,进而开展了一系列研