白内障是全世界范围内首位致盲性疾病,严重地影响了人类的生活质量。因此,开展白内障的发病机理和预防的研究具有重要的科学意义。晶状体上皮细胞的正常分化是保证晶状体发育和功能正常的基础,一旦分化过程受到干扰,就会引发晶状体病变,诱发白内障。研究表明,单一的Sep15基因敲除就会引发小鼠发生白内障,其机理仍不清楚。基于晶状体蛋白是晶状体上皮细胞分化的生物标志物,本文主要以人晶状体上皮细胞(hLEC)SRA01/04中β-晶状体蛋白为研究对象,运用了MTT、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹以及基因沉默等方法,研究了Sep15基因沉默对衣霉素(Tm)诱导内质网应激、抑制β-晶状体蛋白表达的影响。主要实验结果如下:(1)不同浓度的Tm对细胞的抑制作用,呈浓度依赖性。当Tm浓度为5.0?g/mL处理hLEC时,可明显诱发细胞内质网应激,上调GRP78蛋白的表达,对β-晶状体蛋白的表达却产生明显的抑制作用。(2)较低浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)可以促进细胞的增殖,而高浓度的bFGF却会诱发细胞死亡。40 ng/mL的bFGF可促进hLE细胞的分化,上调了α-,β-晶状体蛋白的表达,其中β-晶状体蛋白的表达增加更明显。当用bFGF和Tm共同处理hLEC时,β-晶状体蛋白的表达因内质网应激而受到明显的抑制。(3)当Sep15基因沉默之后,虽然GRP78蛋白的表达没有明显的变化,但加剧了衣霉素诱发的内质网应激导致的β-晶状体蛋白表达的抑制。我们的实验结果表明,Sep15可能在晶状体上皮细胞分化时对β-晶状体蛋白的表达具有一定的保护作用,但其机理并不是通过对衣霉素所致的晶状体上皮细胞内质网应激的调节途径实现的。