补肾活血方治疗自身免疫性卵巢早衰小鼠的实验研究

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目的:利用自身免疫性卵巢早衰(APOF)小鼠模型,对比观察补肾活血中药方的治疗作用,初步探讨该方改善卵巢功能的相关机制。方法:将75只雌性小鼠,随机选出正常组(N)15只,其余60只全部采用小鼠透明带多肽3(zona pellucida pepitide 3,pZP3)进行先后两次主动免疫,模型建立完毕,将60只小鼠随机分为以下四组:模型组(M)、倍美力组(E)、泼尼松组(P)、中药组(Z),各组15只。正常组和模型组予三蒸水0.5ml/天灌胃,其余三组分别用相应的药液0.5ml/天灌胃,每连续灌胃六天后休息一天,持续四周后采血并处死动物留取标本。用ELISA法检测如下血清指标:雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH),抗透明带抗体(AzpAb)。右侧卵巢组织通过免疫组化方法,光镜下观察卵泡发育情况及卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白的表达。左侧卵巢组织,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)法,观察其卵泡刺激素受体mRNA(FSHRmRNA)的含量。结果:(1)模型组与正常组比较:模型组小鼠周期紊乱率上升,(P<0.0045);血清E2水平显著降低(P<0.01);血清FSH水平及AzpAb水平均显著升高(P均<0.01);卵巢组织FSHRmRAN差别无意义(P>0.05)。(2)西药治疗组与模型组比较:倍美力治疗组周期紊乱率下降,(P<0.0045);血清E2水平升高,(P<0.05);FSH水平显著降低(P<0.01);卵巢组织FSHRmRAN升高(P<0.05);血清AzpAb浓度降低不明显,(P>0.05)。泼尼松组血清E2水平显著升高(P<0.01);血清FSH水平AzpAb浓度均显著降低(P均<0.01);卵巢组织FSHRmRAN差别无意义(P>0.05)。(3)中药组与模型组比较:中药组周期紊乱率下降(P<0.0045);血清E2水平显著升高,(P<0.01);血清FSH水平及AzpAb浓度均降低(P<0.05);卵巢组织FSHRmRNA含量显著升高(P<0.01)。(4)中药组与西药组比较:中药组血清AzpAb浓度较倍美力组降低(P<0.05);卵巢组织FSHRmRAN含量较倍美力组升高(P<0.05),较泼尼松组显著升高(P<0.01);E2、FSH及FSH受体蛋白表达与两组西药组比较均无差别(P>0.05)。结论:1、补肾活血方对自身免疫性卵巢早衰模型小鼠具有较好的治疗作用。2、补肾活血方可能通过增加卵巢E2分泌,降低垂体FSH分泌;抑制卵巢局部抗原抗体反应;增加卵巢FSHRmRNA含量等机制改善模型小鼠的卵巢功能。
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