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目的:研究急性百草枯中毒大鼠肾损伤时炎症因子的动态变化及姜黄素的干预作用和机制。 方法:1.将清洁级SD大鼠(60只)随机的分成4组,正常对照组,姜黄素对照组,百草枯染毒组(2%质量浓度的百草枯溶液100mg/kg灌胃染毒),姜黄素干预组(百草枯灌胃染毒后,分别在15min、24h、48h3个时间点,于腹腔内注射50mg/kg姜黄素)每组各15只。在经过以上不同处理后,第1、3、7天从各组随机抽取5只大鼠,麻醉处死,高速离心下腔静脉血取上清,同时留取肾组织,-80℃保存。 2.各组大鼠经过不同处理后观察它们的行为学改变。 3.苦味酸比色法测定血清肌酐水平,脲酶法测定尿素氮水平。双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测大鼠肾组织细胞核内NF-κB蛋白表达量。 4.观察光镜下各组大鼠肾组织的病理变化。 结果:1.正常对照组和姜黄素对照组各大鼠表现活动灵敏,反应自如,进食正常,皮毛光滑。而百草枯染毒组各大鼠,在染毒30分钟后开始,活动表现增多,呈易激惹状态;6h后表现懒散,活动量逐渐减少,走路晃动,喜蜷缩,呼吸急促,不进食,毛发战栗;3天时表现最重;在7天时观察到大鼠精神状态较前有好转,活动量有所增加,进食量基本恢复。姜黄素干预组以上症状都较百草枯染毒组为轻,7天时症状基本好转,活动饮食增加。 2.与正常对照组比较,姜黄素对照组各项指标水平无明显变化,结果无显著性差异(P>0.05)。百草枯染毒组,肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表达显著升高,肌酐、尿素氮水平水平在第3天达到峰值,NF-κB蛋白表达在第1、3、7天持续升高,差异均具有统计学意义(P<0.05),百草枯染毒组,IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表达均显著升高,IL-1β、IL-10、TNF-α mRNA表达在第3天达峰值,IL-6水平则持续升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与同时间点百草枯染毒组相比,姜黄素干预组在第1、3、7天,肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表达量显著下降,IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达亦显著降低,IL-10水平则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 3.光学显微镜下可见,正常对照组和姜黄素对照组肾小管、肾小球结构完整,肾小管管腔正常。百草枯染毒组大鼠肾组织在染毒后第3天,病理损害表现最严重,表现为肾小球球囊间隙明显增大,细胞排列紊乱,组织出现明显的玻璃样变性,并伴有管型尿,出现空泡样变性,肾小管管腔上皮细胞脱落。而对应时间点姜黄素干预组病理损害都较同时间点百草枯染毒组有所减轻。 结论:炎症反应在急性PQ中毒肾损伤过程中起到了重要作用,姜黄素通过下调NF-κB的表达,降低肾组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、 IL-6mRNA表达水平,升高IL-10水平,而减轻PQ所致肾损伤的炎症反应,从而保护肾功能,降低肌酐、尿素氮水平,对急性PQ中毒所致的肾损伤有一定的保护作用。