目的：观察采用中西药处方治疗少弱畸精子综合症(oligo-asteno-teratozoospermia syndrome，OAT)患者前后的精子染色质变化。对精子吖啶橙(acridine orange，AO)染色后，从激光共聚焦显微镜观察(fluorescence microscope，FM)与流式细胞术分析(flow cytometry，FCM)两种方法进行评价，与计算机辅助精子分析相结合，明确精子激光共聚焦显微镜观察与流式细胞术分析在男性生育力判断与不育症疗效评价体系中的作用。 方法： 1.一般资料随机选取2007年1月～2007年6月就诊于河北工程大学临床医学院、邯郸市妇幼医院、河北峰峰集团公司邯郸医院的OAT患者42例。入选标准：参照WHO精液分析标准(1999年)与2004年EUA男性不育诊疗指南。排除标准：梗阻性无精子症、克氏征、支持细胞综合症。患者年龄22～35岁，平均32岁。给予中西药处方治疗。治疗前后留取精液标本，留取前禁欲3～5d。手淫法取精，立即置37℃孵箱液化。 2仪器与试剂 仪器：流式细胞仪(美国BD公司，FACSCalibur型)。激光共聚焦扫描显微镜(美国BIO-RAD公司，MRC-1024型)。精子分析仪(北京清华同方公司，彩色版5.0)。 试剂：吖啶橙(acridine orange，AO)：北京华美公司。10×TEN缓冲液。酸处理液。AO储存液。染色缓冲液。AO染液。保存于棕色瓶中。 制备参考样品。 3方法 将精液分为三份同时送检。计算机辅助精子分析。精子AO染色激光共聚焦显微镜观察。精子染色质结构流式细胞术分析。 4统计学方法：实验数据经SPSS11.5统计软件包进行统计学处理，计量资料的比较采用t检验。a=0.05为显著性检验水准。 结果： 1计算机辅助精子分析：少弱畸精子综合征经中西药处方治疗前后精子参数密度和畸形率等均有变化，治疗后较治疗前明显改善，其差异有统计学意义(P＜0.05)；而(a+b)级活动力和活动率、直线运动精子等变化不明显，其差异无统计学意义(P＞0.05)。 2精子AO染色激光共聚焦显微镜观察：可见AO可与双链DNA结合呈单体形式发出绿色荧光，与单链DNA结合呈聚合物形式发出红或黄色荧光，可以初步判断核染色质状态。绿色与红色荧光差异有统计学意义(P＜0.05)。另外经切换光源观察到，部分正常形态的精子AO染色是黄色，说明精子正常形态和精子核成熟度无相关性。 3精子染色质结构流式细胞术分析：少弱畸精子综合征经中西药处方治疗前后αt、SD αt和COMP αt发生变化，其中αt和COMP αt差异有统计学意义(P＜0.05)。主群精子指数(master-group sperm index，MGSI)也存在显著变化，其差异有统计学意义(P<0.01)。在正常状态的精液中，该群体精子量直接反应本次精液的可受精能力。在治疗前后检测主群精子指数(MGSI)的变化，可以客观了解本次射出体外的精子核聚合程度。结论： 通过不同方式对少弱畸精子综合征经中西药处方治疗前后精子的研究，得到： 1计算机辅助精子分析，可以了解本次射出体外精液的精子外部特征，能够反映治疗前后精液的改善状况。 2精子AO染色激光共聚焦显微镜观察，可以初步了解本次射出体外精液的精子核聚合程度，进一步揭示了治疗前后精子的核成熟程度的变化。 3精子染色质结构流式细胞术分析，显示了治疗前后精子αt、SD αt和COMP αt参数变化，对于反映精子负面质量较为肯定。本研究中，主群精子指数(MGSI)确定也是以综合设门后，Cell Quest软件分析所得，发现治疗前后主群精子指数(MGSI)存在显著差异。主群精子的变化直接与可受精能力有关，也最能反映治疗前后精子变化的意义。 4少弱畸精子综合症采用中西药处方治疗前后，三种检测方法从不同角度提示精子得到有效改善。将流式细胞术分析等测定联合常规检测引入男性不育疗效评价体系，更能较为全面的揭示治疗前后精子内外特征的变化。