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目的研究NF-κB特异性抑制剂PDTC (pyrrolidine dithiocarbamate)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及星形细胞上调基因AEG-1表达的影响,为进一步了解PDTC体外抗肺癌作用的价值及机制,为肺癌预防和治疗提供重要的实验室基础和依据。方法1.体外培养人非小细胞肺癌A549细胞株,用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC处理A549细胞,分别于24、48和72h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞光密度值,分析PDTC对细胞增殖的抑制作用;2.流式细胞术检测药物处理后细胞的周期变化情况;3. Hoechst33342荧光染色观察药物处理后细胞形态变化情况;4. RT-PCR检测AEG-1的mRNA表达情况;5.采用SPSS17.0统计软件分析所有检测数据,进行均值、标准差计算,并做相应的统计分析,结果用均数±标准差表示。多样本均数比较时,经方差齐性检验后,若方差齐性则采用单因素方差分析(F检验),若不符合方差齐性则采用Kruskal-Wallis检验。以P<0.05为有统计学意义。结果1.MTT结果显示:PDTC能有效抑制A549细胞的生长,各浓度处理组的细胞经不同时间处理后,其增殖抑制率与同一组同一时间点的对照组相比,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05),并且具有时间和剂量依赖性;2. PDTC(?)改变A549细胞的周期分布,作用后细胞的G0/G1期细胞比例上升。各浓度组的细胞周期分布与同一时间点对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),呈时间和剂量依赖性。3. Hoechst33342荧光染色后显微镜下观察显示:药物作用组细胞形态不规则,有典型的细胞核凝聚特征并出现凋亡小体等明显凋亡改变;4. RT-PCR和Western blot结果显示:随着PDTC浓度的增加及作用时间的延长,癌细胞内AEG-1mRNA和蛋白表达水平显著降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论PDTC可以抑制A549细胞的增殖、改变其周期分布、诱导其凋亡,且呈一定的剂量和时间依赖性,其机制可能与PDTC抑制NF-κB、下调AEG-1表达有关。