荧蒽暴露对小鼠支气管哮喘的影响

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目的:探讨不同浓度荧蒽暴露对小鼠支气管哮喘的影响。方法:选择雄性Balb/c小鼠70只,随机分为7组,每组各10只。C组为哮喘模型组,利用新鲜配置卵清蛋白(OVA)20ug+氢氧化铝lmg共0.2ml于第1,8,15天给予小鼠腹腔注射致敏,第22天开始给予3%卵清蛋白(OVA)+生理盐水溶液雾化吸入,每天1次,每次30分钟,连续雾化7天。A组为正常对照组,以生理盐水代替卵清蛋白分别进行腹腔注射和雾化吸入,步骤同C组。B组为酒精对照组,以95%酒精溶液代替卵清蛋白,步骤同C组。D组为单纯荧蒽低浓度暴露组,E组为单纯荧蒽高浓度暴露组。F组为荧蒽低浓度暴露+哮喘模型组,G组为荧蒽高浓度暴露+哮喘模型组。D、F组制备哮喘模型前暴露于荧蒽低浓度(10 ug/m3);E、G组制备哮喘模型前暴露于荧蒽高浓度(100 ug/m3),暴露染毒时在玻璃熏气箱中进行动式染毒,每日4小时,连续2周。同时A,B,C组也在同样大小的玻璃箱中接受新鲜空气,每日4小时,连续2周。F、G组暴露染毒后,再以卵清蛋白致敏,步骤同C组。各组攻击结束一周后,再给予3%卵清白蛋白激发气道30分钟,并利用多道信号采集处理系统测定气道阻力15分钟;计数肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数;检测肺组织中丙二醛水平(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清工gE和IL-4、IL-5的表达水平;并观察肺组织病理形态学的变化。结果:①A、B组小鼠吸入MCH后气道阻力比值相似。C、D、E、F、G组小鼠气道阻力比值均高于对照组,C、F、G组均有统计差异性(P<0.01),D、E组无统计差异性(P>0.05)。与C组相比较,F、G组小鼠气道阻力比值均有所升高,仅有G组比较差异有统计学意义(P<0.01)。②在支气管肺泡灌洗液中A、B组见少量的嗜酸性粒细胞(EOS)。C、D、E组支气管肺泡灌洗液中EOS数占细胞总数的百分比明显高于A组,比较差异有统计学意义(P<0.01)。与C组相比较,D、E组中EOS数占细胞总数的百分比有所升高,但无统计差异性(P>0.05)。③A、B、C组肺组织中的丙二醛水平(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量相似,无统计学差异。D、E、F、G组中肺组织SOD、GSH-Px的含量均低于对照组;MDA的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。并且荧蒽高浓度组(E、G组)SOD、GSH-Px的含量比低浓度组(D、F组)降低;MDA含量比低浓度组(D、F组)升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。④A、B、D、E组血清中IgE、IL-4、IL-5的浓度相似。与对照组比较,C、F、G组小鼠血清中IgE、IL-4、1L-5的浓度明显增高,且差异均有统计学意义(P<0.01)。与C组比较,F、G组小鼠血清中IgE、IL-4、IL-5的浓度均有升高,比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑤肺组织病理切片中可以看到A、B组支气管上皮细胞完整,无变性、坏死,间质内未见炎症细胞的浸润,血管周围未见水肿。C、D、E、F、G组出现上皮细胞有不同程度坏死、中断、脱落,气道周围的炎症细胞浸润及血管周围水肿等改变,并且荧蒽浓度越高,肺组织受损伤程度越重。结论:荧蒽暴露可以增强小鼠的脂质过氧化反应,加重小鼠肺组织炎性细胞的浸润。高浓度荧蒽暴露可以加重哮喘小鼠的病情。
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