论文部分内容阅读
研究背景：癫痫是最常见的神经系统疾病之一，发达国家的患病率达到5～10‰，中国的患病率为3.5～4.8‰。作为临床上主要的药物难治性癫痫，内侧颞叶癫痫(mesialtemporallobeepilepsy，MTLE)是发病率最高的成人发作的局灶性癫痫。散发的MTLE是一类遗传因素和环境因素共同作用的复杂性疾病。基因水平变异可能通过影响抽搐发作易感性、药物反应及临床特征等多个方面对MTLE的发生、发展及预后产生效果。环境因素包括头部外伤、中枢神经系统感染、产伤、热性惊厥或颅脑肿瘤等。目前的研究提示，包括MTLE在内的癫痫等发作性疾病是一种离子通道病，但MTLE的遗传易感基因方面各种群间还没有发现一致的证据。本文应用病例对照的研究方法，以γ-氨基丁酸B型受体2亚基γ-aminobutyricacidtypeBreceptor2，GABBR2)基因、γ-氨基丁酸B型受体1亚基γ-aminobutyricacidtypeBreceptor1，GABBR1)基因、朊蛋白(prionprotein，PRNP)基因和大电导钙离子激活钾离子通道M亚系β4亚基(potassiumlargeconductancecalcium-activatedchannel，subfamilyM，betamember4，KCNMB4)基因为候选基因，分析遗传因素与中国汉族人群MTLE的相关性。
研究方法
以MTLE患者和非癫痫受试者为研究对象，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP)方法、测序方法检测中国汉族人群标签SNPs(tagSNPs)，结合功能SNPs，分析这些SNPs与MTLE的相关性并探讨基因型/单倍型与癫痫临床表型的关联。
研究结果
1.GABBR2基因多态性与MTLE的相关性
在315名MTLE患者和318名非癫痫对照受试者中，经logistic回归分析调整性别混杂因素影响后，GABBR2基因rs967932的A等位基因在MTLE组的频率显著高于非癫痫对照组频率(48.43％vs.41.59％；递加模型下P=0.018，OR=1.305，95％CI1.048-1.624，显性模型下P=0.003，OR=1.667，95％CI1.186-2.343)。Bonferroni多重比较校正后，显性模型下rs967932的基因型频率组间分布仍可见显著性差异(P=0.036)。另外，rs1999501和rs944688的基因型频率在显性模型下也可见MTLE组和非癫痫对照组间的显著性差异(P分别为0.033和0.025)，但这些差异在Bonferroni校正后消失。GABBR2基因rs3780428、rs1999501、rs967932和rs944688组成的单倍型G-C-A-C在MTLE组的频率显著高于非癫痫对照组频率(12.26％vs.6.51％，P=0.0004)。Bonferroni校正后单倍型G-C-A-C仍为MTLE的风险因素(P=0.002，OR=2.028，95％CI1.359-3.024)。携带此单倍型MTLE患者的发病时间较不携带患者显著提前(14岁vs.19岁，P=0.028)。
2.GABBR1基因多态性与MTLE的相关性
在315名MTLE患者和318名非癫痫对照受试者中，rs29259的C等位基因频率在非癫痫对照组的频率显著高于MTLE组(显性模型下P=0.046，OR=0.697，95％C10.488-0.994)，但Bonferroni校正后显著性差异消失(P=0.276)。rs29261的各基因型/等位基因频率在递加模型、显性模型和隐性模型下均未见MTLE组和非癫痫对照组间的分布差异。G1465A位点则未检测出多态性。由rs29259和rs29261组成的单倍型频率组间分布分析中，未见各单倍型频率在MTLE组与非癫痫对照组间的显著分布差异。将MTLE患者按照是否合并海马硬化进行分组，比较有/无海马硬化患者组间rs29295和rs29261的基因型及等位基因频率，仍未见显著的组间差异。
3.PRNP基因多态性与MTLE的相关性
在320名MTLE患者和558名非癫痫对照受试者中，没有发现PRNP基因M129V的VV基因型。M129V的MM和MV基因型/等位基因频率在MTLE组和非癫痫对照组间的频率分布没有统计学差异(基因型：P=0.240：等位基因：P=0.240)。将受试者按照性别分组分析时，该位点的各基因型/等位基因频率未见显著的组间差异。将受试者按照小于50岁和不小于50岁分组分析时，该位点的各基因型/等位基因频率仍无组间差异。临床表型分析中未见携带该位点MV基因型MTLE患者的显著异常。
4.KCNMB4基因多态性与MTLE的相关性
在合计321名MTLE患者和496名非癫痫对照受试者中，KCNMB4基因的rs787931、rs9634299和rs10784846的各基因型/等位基因频率在递加模型、显性模型和隐性模型下均未见MTLE组和非癫痫对照组间的频率分布差异。这三个位点组成的单倍型频率分布分析中，未见MTLE组和非癫痫对照受试者组间频率大于3％常见单倍型的频率分布差异。将MTLE患者按照是否合并海马硬化进行分组，比较有/无海马硬化患者组间3个位点的基因型及等位基因频率，仍未见显著的组间差异。
研究结论
综合上述，本研究为以GABBR2基因、GABBR1基因、PRNP基因和KCNMB4基因为候选基因、以中国汉族MTLE患者为病例、以非癫痫受试者为对照开展的病例对照研究，可得出如下结论：携带GABBR2基因rs967932-A等位基因是MTLE发生的危险因素，GABBR2基因是中国汉族MTLE的遗传易感基因；而GABBR1基因、PRNP基因和KCNMB4基因对MTLE易感性的贡献可能不大。