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病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是小儿最常见心血管系统疾病,病情轻重不一,多数患儿预后良好,部分患儿可发展为扩张型心肌病、致残性心律失常。VMC的发病机制尚不明确,涉及病毒的直接损伤、免疫机制、细胞凋亡、心肌纤维化、生化机制等,免疫机制一直以来是研究的热点。小凹(caveolae)是定位于细胞质膜上的膜结构,可从细胞质膜上脱落下来形成囊泡,把细胞外的生物活性分子通过吞饮作用向胞内转移、参与多种信号转导过程。小凹蛋白-3(Caveolin-3)主要表达在心脏,骨骼和平滑肌的肌细胞中。研究表明, TGF-β1及其下游蛋白smad3构成的信号通路在心肌纤维化的发生中具有重要作用;Caveolin参与冠心病、心肌病、糖尿病大血管病变等多种疾病的发展过程。在病毒性心肌炎发生机制中,Caveolin-3的作用以及Caveolin-3是否可调控TGF-β1/smad3信号通路的表达目前尚未见报道。银杏叶提取物具有广泛的药理作用,如具有改善毛细血管的通透性、扩张冠状动脉、改善心肌血液循环、降低心肌细胞耗氧量等多种功能,临床已用于心血管疾病、肾病综合征、糖尿病、老年痴呆等心脑血管疾病的预防和治疗。本研究用CVB3感染大鼠原代心肌细胞,同时加入银杏叶提取物,检测银杏叶提取物对大鼠心肌细胞的保护作用及毒性作用,同时通过western-blot、免疫组化方法检测大鼠心肌细胞内Cav-3、TGF-β1、smad3蛋白表达量变化。另外,通过CVB3感染Balb/C小鼠建立病毒性心肌炎小鼠模型,通过HE染色观察小鼠心肌病理变化,通过Masson染色观察各组小鼠心肌纤维化程度;然后分别通过RT-PCR、western-blot、免疫组化方法检测小鼠心肌Cav-3、TGF-β1、smad3蛋白表达量及mRNA变化。体内、体外实验结果显示,Cav-3、TGF-β1及smad3蛋白在病毒感染后表达增加,银杏叶提取物能够改善小鼠心肌病理变化,降低心肌纤维化程度,银杏叶提取物是通过下调Cav-3、TGF-β1及其下游蛋白smad3的表达,以实现治疗病毒性心肌炎的作用,其治疗效果与参麦注射液相当,为临床应用银杏叶提取物治疗VMC提供了理论和实验依据。本研究创新点:(1)Cav-3、TGF-β1及smad3蛋白在病毒性心肌炎中的作用少见报道,本研究显示其在病毒性心肌炎发病中具有一定的作用;(2)本研究探讨了银杏提取物对病毒性心肌炎中的Cav-3、TGF-β1和smad3蛋白表达的影响,及其对病毒性心肌炎的治疗作用。