MAPK/C-Jun信号通路参与介导EB病毒编码BARF1上调胃癌细胞原癌基因bcl-2和bcl-xL的表达

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目的:探讨EB病毒(EBV)编码的BARF1基因对人胃上皮细胞(GEC)ERK1/2-、JNK1/2/3-和p38-MAPK/c-Jun信号通路活性及原癌基因bcl-2和bcl-xL表达的影响。  方法:分别以pSG5真核表达载体稳定转染的永生化正常人胎儿胃上皮细胞系GES1(GES-SG),以及高分化、中分化和低分化人胃癌细胞(GCC)系MKN28、SGC7901和BGC823(MKN-SG、SGC-SG和BGC-SG)为对照,采用免疫印迹法分析BARF1稳定表达的以上细胞系(GES-BARF1、MKN-BARF1、SGC-BARF1和BGC-BARF1)中ERK1/2-、JNK1/2/3-、p38-MAPK和c-Jun蛋白的表达量和磷酸化水平,以及Bcl-2和Bcl-xL蛋白的表达状况,并进一步分别采用ERK1/2-、JNK1/2/3-和p38-MAPK的特异性抑制剂U0126、SP600125和SB203580处理SGC-BARF1细胞后,重新测定c-Jun、Bcl-2和Bcl-xL的表达,以及c-Jun的磷酸化水平。  结果:(1)与各自的对照相比,GES-BARF1细胞中c-Jun、Bcl-2和Bcl-xL蛋白的表达量,以及ERK1/2、JNK1/2/3、p38和c-Jun蛋白的磷酸化水平变化不显著(p>0.05)。  (2)与各自的对照相比,3种BARF1稳定表达的GCC(GCC-BARF1)中c-Jun(p<0.01、p<0.05和p<0.01)、Bcl-2(p<0.05、p<0.01和p<0.01)和Bcl-xL蛋白(p<0.05、p<0.01和p<0.01)的表达量,以及ERK1/2、JNK1/2/3、p38(三者均分别为p<0.05、p<0.01和p<0.01)和c-Jun蛋白(p<0.05、p<0.05和p<0.01)的磷酸化水平均显著增加。分别采用U0126、SP600125和SB203580处理SGC-BARF1后,c-Jun、Bcl-2(二者均为p<0.05、p<0.05和p<0.01)和Bcl-xL蛋白(p<0.05、p<0.01和p<0.01)的表达量,以及c-Jun蛋白的磷酸化水平(三者均为p<0.05)均显著下降。  (3)GCC-BARF1组c-Jun蛋白表达量和磷酸化水平(p<0.05和p<0.01)与Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平均高于GES-BARF1(二者均为p<0.05),且从正常GEC、高分化、中分化到低分化GCC,4组GEC-BARF1中c-Jun蛋白表达(r=0.692和r=0.507)和磷酸化水平(r=0.505和r=0.596)与Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平之间呈正相关关系,并有逐渐增加的趋势(r2=0.686、r2=0.682、r2=0.886和r2=0.786),但均无统计学意义(p>0.05)。  结论:ERK1/2-、JNK1/2/3-和p38-MAPK/c-Jun级联信号通路参与介导了BARF1上调GCC中原癌基因bcl-2和bcl-xL表达的过程,这一机制可能主要在EBV相关胃癌的进展期起作用。
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