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目的:干眼病（dry eye disease,DED）是一种常见的慢性多因素眼表疾病,严重影响患者生活质量。近年来的研究表明,炎症在DED的发病机制中起关键作用,涉及先天性和适应性免疫应答。马来酸蒿乙醚胺（SM934）是一种水溶性青蒿素类似物,具有抗炎和免疫抑制作用。本研究对SM934在东莨菪碱氢溴酸盐（Scopolamine hydrobromide,SCOP）诱导大鼠泪液不足型干眼症模型和苯扎氯铵（Benzalkonium chloride,BAC）诱导大鼠蒸发过强型干眼症模型的药效进行评价,并通过体内外实验,深入探索其作用机制。方法:1、大鼠干眼症模型建立及SM934药效评价:（1）SM934对SCOP诱导大鼠ADDE的疗效及机制作用。造模前根据泪液分泌量及角膜荧光素钠染色评分,将大鼠随机分为正常组、模型组、0.1%SM934滴眼液组、0.5%SM934滴眼液组、基质对照组。除正常组外,均采用皮下注射12.5 mg/d SCOP诱导大鼠ADDE模型,4次/天,持续7天。造模的同时局部给药,SM934治疗组大鼠分别予以0.1%SM934、0.5%SM934滴眼液进行干预,基质对照组予以基质做对照,每只大鼠给药量为20μl/眼,每天给药4次。用药后第3、5、7天检测泪液分泌量及角膜荧光素钠染色,评价泪液分泌及角膜屏障功能。各组大鼠均于第8天进行安乐死并取材。（2）SM934对BAC诱导大鼠EDE模型的治疗作用。将大鼠进行随机分组,除正常组外,其余各组大鼠均采用0.5%BAC-生理盐水溶液滴眼诱导EDE模型,12 h/次,每天2次。5天后根据评价指标（角膜血管新生、角膜不透明度、结膜刺激性、虎红染色）评分,进行二次分组,分为模型组、0.1%SM934滴眼液组、0.5%SM934滴眼液组、基质对照组。继续造模并开始给药,SM934治疗组大鼠分别予以0.1%SM934、0.5%SM934滴眼液进行干预,基质对照组予以基质做对照,每只大鼠给药量为20μl/眼,每天给药4次,持续给药10天,实验共15天。用药后第4、7、10天在裂隙灯下对评价指标进行评分并拍照。各组大鼠均于第16天进行安乐死并取材。结膜组织切片通过PAS染色观察结膜杯状细胞数量;苏木精-伊红（H＆E）染色观察角膜上皮细胞变化;免疫组化法检测角膜组织紧密连接蛋白ZO-1表达及结膜组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）表达;免疫荧光染色法检测角膜MMP-9蛋白表达;q RT-PCR法检测结膜组织MUC5AC m RNA表达及角膜TNF-α、IL-1βm RNA表达;ELISA法检测结膜组织TNF-α、IL-6、MCP-1等炎症因子表达。2、SM934对ADDE模型大鼠结膜组织TLR4/MyD88/NF-κB/NLRP3信号途径的影响。免疫荧光共染法检测结膜组织CD68与TLR4蛋白表达;免疫组化法检测各组结膜组织中TLR4、My D88、NLRP3蛋白表达;Western Blot法检测各组结膜组织TLR4、My D88、NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1蛋白表达。3、SM934对RAW 264.7小鼠巨噬细胞炎症反应及TLR4/My D88/NF-κB/NLRP3信号途径的影响。MTT法检测SM934对RAW264.7细胞活力的影响;LPS刺激RAW264.7细胞48 h后,ELISA法检测培养基上清IL-6、TNF-α、IL-1β含量;LPS刺激RAW264.7细胞,Western Blot法检测不同时间点TLR4、My D88、NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1蛋白表达;SM934预孵育RAW264.7细胞24 h后加入LPS刺激,Western Blot法检测TLR4、My D88、NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1蛋白表达。结果:1、SCOP模型组大鼠泪液分泌量显著下降,角膜荧光素钠染色评分显著增加,结膜上皮组织杯状细胞数量明显减少,H＆E染色可见模型组角膜上皮细胞增殖及细胞层数较正常组显著增加（P＜0.01）,但角膜厚度与正常组相比并无显著差异。模型组角膜组织ZO-1表达较正常组显著降低,MMP-9表达较正常组显著增加,TNF-α和IL-1βm RNA表达较正常组显著增加,结膜组织MPO表达及TNF-α、IL-6和MCP-1含量均较正常组显著增加。SM934滴眼液组可显著增加泪液分泌量,降低角膜荧光素钠染色评分,维持杯状细胞数量（P＜0.001）,其中0.5%SM934优于0.1%SM934。H＆E染色可见SM934组角膜细胞层数较模型组均显著减少（P＜0.01）。0.5%SM934组角膜ZO-1表达较模型组显著增加（P＜0.01）,MMP-9表达较模型组显著减少（P＜0.05）,TNF-α和IL-1βm RNA表达显著降低（P＜0.001）,结膜MPO表达及TNF-α、IL-6和MCP-1含量均较模型组显著降低（MPO,P＜0.05;TNF-α,IL-6,MCP-1,P＜0.001）。2、BAC模型组大鼠眼表新生血管、角膜不透明度、结膜刺激性评分及角膜虎红染色评分均较正常组显著增加,SM934滴眼液组均较模型组明显降低;模型组杯状细胞数目较正常组显著减少（P＜0.001）,基质组较模型组杯状细胞数目无显著差异,而SM934滴眼液组杯状细胞数目均显著多于模型组,其中以0.5%SM934最为显著（0.5%SM934,P＜0.001;0.1%SM934,P＜0.01）;模型组结膜组织IL-6、TNF-α、MCP-1含量显著增加（P＜0.001）,基质组较模型组并无显著降低,而SM934滴眼液组均不同程度降低,其中0.5%SM934改善最为显著（TNF-α,P＜0.01;IL-6,P＜0.01;MCP-1,P＜0.001）。3、模型组大鼠结膜组织CD68与TLR4表达较正常组显著增加且共定位,0.5%SM934组CD68与TLR4表达较模型组显著减少;模型组TLR4、My D88、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1表达及p-NF-κB/NF-κB蛋白比值均较正常组显著增加（TLR4,My D88,p-NF-κB/NF-κB,Cleaved Caspase-1,P＜0.05;NLRP3,ASC,P＜0.01）,而0.5%SM934可显著降低其表达（TLR4,My D88,P＜0.05;p-NF-κB/NF-κB,NLRP3,ASC,Cleaved Caspase-1,P＜0.01）。4、LPS可诱导Raw264.7细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达的显著增加,SM934可显著抑制其表达;LPS刺激后,RAW264.7细胞TLR4、pNFκB、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1表达均显著增加,而SM934可显著降低其表达（P＜0.05）。结论:1、东莨菪碱氢溴酸盐与苯扎氯铵可诱导出稳定可靠的用于评价药效的大鼠干眼症模型。2、SM934可显著改善大鼠干眼症模型的泪液分泌量、角膜荧光素钠染色、角膜血管新生、角膜不透明度、结膜刺激性及虎红染色等指标,从而改善临床相关表现。3、东莨菪碱氢溴酸盐诱导的大鼠干眼症模型结膜组织中有巨噬细胞浸润并激活TLR4/My D88/NF-κB/NLRP3信号途径。4、SM934可通过减轻角、结膜炎症改善东莨菪碱氢溴酸盐及苯扎氯铵诱导的大鼠干眼症。5、SM934对角结膜炎症的改善作用可能与调控TLR4/My D88/NF-κB/NLRP3信号途径从而抑制结膜组织巨噬细胞的炎症反应有关。