论文部分内容阅读
灭活成份血液内的病原体、抑制其残留的白细胞释放细胞因子是保证临床安全输血的一种重要手段。目前，对于血浆的病原体灭活技术发展相对成熟，已有部分应用于临床，而对于红细胞和血小板尚属于研究阶段。先前，有学者使用亚甲蓝(MB)光化学和补骨酯衍生物（Amotosalen）S-59光化学可有效灭活血小板内模型病毒和白细胞，但MB光化学法处理的血小板对FⅧ和纤维蛋白原影响较大，而且MB法本身有一定的生物毒性；而经S-59处理后的血液，需用特殊仪器将其去除，因此以上两种方法均不理想。核黄素是人体必需的一种水溶性的维生素，广泛的存在于人体器官中，它可插入病原体RNA和DNA，在紫外/可见光激活下，发生电子转移，与病原体核酸的鸟嘌呤共价结合，介导核酸断裂。本研究运用紫外光作为激发光源联合核黄素来灭活单采血小板悬液中的指示病毒，同时抑制血小板内残留的白细胞释放细胞因子。目的：研究核黄素联合紫外光进行血小板病毒灭活的安全性、有效性及对血小板保存中白细胞释放细胞因子抑制作用；观察灭活后血小板体外各参数的变化。方法：实验组:将人巨细胞病毒标准株(HCMV AD169)以一定比例注入单采血小板中,混匀后加入核黄素溶液，以一定辐照剂量的紫外光照射，检测照射前、后病毒滴度和照射后不同时间细胞因子的变化,并观察体外血小板部分参数的变化。阴性对照组：为相同来源新鲜单采血小板，同步检测其细胞因子的含量和血小板体外各参数。以植物凝集素(PHA)同步刺激两组血小板，用ELISA方法检测细胞因子的含量。结果：实验组经浓度150μmol/L的核黄素结合辐照剂量为1500mJ/cm2的紫外光（250<λ<350nm）照射10min可有效灭活血小板中病毒；对照组细胞因子含量随着保存时间的延长而显著增加；实验组第3d和第5d的细胞因子含量相对于保存前(0d)差异无显著意义；而在同一保存时间对照组中细胞因子含量高于实验组(P<0.05)；实验组和对照组血小板悬液经过PHA同步刺激后：接受PHA刺激的对照组与未接受PHA刺激的对照组相比，细胞因子含量显著增加（P<0.05）；而接受PHA刺激的实验组与未接受PHA刺激的实验组相比，细胞因子含量无显著变化。结论：核黄素结合紫外光照射可以有效的灭活血小板中病毒，抑制血小板保存中白细胞释放细胞因子的能力，而单采血小板体外诸参数和阴性对照比较无差异。