第一部分幼年特发性关节炎疾病活动度与血清维生素D水平相关性分析目的:通过检测幼年特发性关节炎(JIA)患儿血清25(OH)D3水平,研究患儿体内维生素D状态及与JIA疾病活动度的关系。方法:按2001年ILAR诊断标准纳入110名JIA患儿(男性52例,女性58例,年龄范围3.02-16.60岁,平均年龄9.04±3.37岁,)参与评估,采用高效液相色谱法检测JIA患儿血清25(OH)D3、血浆PTH水平,腰椎DXA扫描评估骨密度。根据2011年ACR标准评价患儿疾病活动状态(活动期、缓解期),并通过JADAS 27评分衡量疾病活动度。比较不同类型及状态下JIA患儿血清25(OH)D3水平及其与其他指标之间的关系。结果:110例JIA患儿血清25(OH)D3平均水平19.9±6.1ng/ml,其中59例(53.6%)为维生素D缺乏状态,43例(39.1%)表现为维生素D不足,8例(5.6%)维生素D充足。活动期患儿25(OH)D3水平低于缓解期(P<0.001),与JADAS 27评分无相关性(P>0.05)。维生素D缺乏状态下JIA患儿骨密度低于维生素充足状态(P<0.001),使用皮质激素(GC)治疗JIA患儿25(OH)D3水平显著低于未使用GC治疗患儿(P<0.001)。结论:JIA患儿普遍存在维生素D水平低下,尤其是起病早,疾病活动度高,以及使用激素治疗的患儿维生素D水平低下且骨量降低显著。维生素D水平在JIA各亚型中无显著性差异。第二部分不同品系实验小鼠关节炎模型构建及IP-10致Th17/Treg失衡在CIA发病中的作用目的:比较不同品系实验小鼠关节炎模型构建成功率,探讨IP-10及其受体致Th17/Treg失衡在胶原诱导关节炎(CIA)小鼠发病中的作用。方法:选择不同日龄DBA1小鼠、C57/B6小鼠、IL-17基因敲除小鼠各16只,随机分为实验组及对照组各8只,将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂按1:1充分混和乳化,于各型实验组小鼠尾根部皮内分别注射100ul/只进行初次免疫,21d后同样方法进行再次免疫;同品系对照组小鼠各8只,尾根部皮下注射等量的PBS并进行关节炎评分,观察关节炎发生率。第二次免疫后42天分别处死小鼠,分离脾细胞,采用流式细胞计数检测两组小鼠脾细胞中IP-10受体CD183+Th17及Treg的细胞比例。结果:实验组中7只DBA1小鼠出现不同程度关节红肿,活动度减少(7/8,87.5%),4只C57/B6小鼠出现关节炎症状(4/8,50.0%),IL-17基因敲除小鼠无一发生关节炎症(0/8,0%),对照组无一例发生关节炎症改变。在第二次免疫后2周、3周,采用关节炎指数(AI)评定两次取平均值作为该小鼠的AI值,记录各品系小鼠关节炎发病程度,结果显示DBA1小鼠关节炎指数显著高于C57/B6小鼠(均值2.0&0.6)。CIA组小鼠脾细胞中CD183+Th17细胞增高而CD183+Treg细胞比例显著下降,与对照组相比有明显差异。结论:牛Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)造模成功率与小鼠品系选择密切相关,其中DBA1小鼠造模成功率最高,IL-17基因敲除小鼠造模不成功,证实IL-17在关节炎发病中可能起到重要作用。趋化因子IP-10可能通过其受体CXCR3(表达CD183+)在Treg、Th17细胞上的表达致Treg/Th17失衡,可能是导致或加重CIA发病的重要原因。第三部分托珠单抗治疗难治性全身型幼年特发性关节炎疗效及安全性观察目的:观察托珠单抗治疗难治性全身型幼年特发性关节炎(s JIA)的疗效及不良反应。方法:比较托珠单抗和糖皮质激素在难治性全身型幼年特发性关节炎中的疗效和不良反应。使用幼年关节炎疾病活动评分27(JADAS27)方法于治疗第6、12和24周评价疾病活动度和安全性。结果:共纳入60例难治性s JIA患者,36例接受托珠单抗联合非甾体抗炎药和(或)糖皮质激素,24例接受糖皮质激素联合非甾体抗炎药治疗。托珠单抗采用静脉滴注,每2周一次,随访时间24周。在治疗第6、12和24周时观察两组的临床症状(发热、皮疹、关节炎症状),检测其炎症指标,并与两组治疗前相比较。两组的JADAS27,ESR和CRP水平在所有观察点较治疗前均有显著改善(P<0.05)。在治疗第6、12和24周,托珠单抗组的JADAS-27评分显著低于糖皮质激素组(P<0.05)。在治疗第6、12周,托珠单抗组的ESR水平显著低于糖皮质激素组(P<0.05)。在治疗第12、24周,托珠单抗组的CRP水平显著低于糖皮质激素组(P<0.05)。与托珠单抗相关的不良反应最常见的是感染、皮疹、转氨酶短暂升高和输液反应,均不影响用药。糖皮质激素相关的不良反应(如感染、生长迟缓)更常见和更严重。结论:托珠单抗治疗难治性s JIA患儿的疗效肯定,其疗效较糖皮质激素更好。托珠单抗的副作用,尤其是感染的发生率明显低于糖皮质激素。