【摘 要】
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四川小麦地方品种-开县罗汉麦3AL染色体臂含有一个天然隐性Ph基因ph-KL,能够诱导其与黑麦或易变山羊草杂种F1的部分同源染色体配对。但是ph-KL在六倍体背景下促进部分同源染色体配对能力还不清楚。本研究以含有6VS.6AL罗宾逊易位系Pm99915-1为外源供体,中国春(CS)ph1b为对照,以原位杂交(FISH和GISH)与分子标记为检测技术,评价ph-KL是否能诱导6VS和6AS配对重组。
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四川小麦地方品种-开县罗汉麦3AL染色体臂含有一个天然隐性Ph基因ph-KL,能够诱导其与黑麦或易变山羊草杂种F1的部分同源染色体配对。但是ph-KL在六倍体背景下促进部分同源染色体配对能力还不清楚。本研究以含有6VS.6AL罗宾逊易位系Pm99915-1为外源供体,中国春(CS)ph1b为对照,以原位杂交(FISH和GISH)与分子标记为检测技术,评价ph-KL是否能诱导6VS和6AS配对重组。主要研究结果如下:1.6VS.6AL易位系Pm99915-1与CSph1b杂交、自交,筛选获得3株染色体组成为19’’+6VS.6AL’+6A’+5Bph1b’’目标F2单株;3个F2单株自交,获得122株ph1b诱导的6VS/6AS重组筛选群体(F3);FISH和GISH筛选到4个6VS/6AS染色体重组单株,分为两种形式:6VS端部小片段插入6AS端部(1-56和5-15)和6AS端部小片段插入6VS端部(1-57与1-73)。功能标记CINAU-NLR1检测表明重组单株1-56与1-57均含Pm21基因,可用于诱导插入型次级小片段易位。2.利用6VS端部PCR标记6S-19和6VS着丝粒区域转录本c56416_g2,成功开发了6VS/6AS端部和着丝粒区域的共显性KASP标记(TV/TA和CV/CA)。两个标记扫描ph1b诱导的6VS/6AS重组筛选群体(F3),成功鉴定出1-56、1-57和1-73三个6VS/6AS重组单株,表明KASP标记TV/TA和CV/CA可有效和快速地筛选6VS/6AS臂内重组。6VS/6AS重组单株5-15的KASP标记结果与细胞学结果不一致的原因还有待进一步验证。3.利用Pm99915-1和开县罗汉麦杂交、回交和自交,构建了1168个单株组成的6VS/6AS重组筛选群体(BC1F2)。KASP标记TV/TA和CV/CA筛选没有发现重组单株,因此不能证明ph-KL基因能诱导6VS/6AS部分同源重组。诱导能力弱、分子标记辅助选择ph-KL基因脱靶或者遗传机制不同可能是ph-KL基因不能有效诱导6VS/6AS重组的原因。
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