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背景子宫内膜异位症(endometriosis，EMs)是育龄妇女常见病和多发病，病因学研究涉及遗传、免疫、内分泌等多种因素的综合作用，其确切的发病机制尚未阐明，但盆腔局部的炎症反应，表现为盆腔局部免疫相关细胞的数量、功能改变和细胞因子的含量改变，在EMs的发生发展中有着极其重要的意义。白细胞介素(interleukin，IL)-6是一种典型的多功能细胞因子，作为一种最常见的前炎症介质，EMs患者腹腔液IL-6含量显著增高。然而，IL-6在EMs中的作用机理复杂，其与EMs分期的关系目前尚存在争议。而巨噬细胞是腹腔液最重要的免疫相关细胞，腹腔液中约90％的细胞为巨噬细胞。文献报道，EMs妇女腹腔液中活化的巨噬细胞显著增多，且巨噬细胞培养上清液中，自发的和诱导产生的IL-6含量明显升高，因此认为腹腔液巨噬细胞是EMs患者明显升高的IL-6的主要来源。IL-6的多种生物学功能不但与其本身的结构有关，很大程度上还取决于IL-6受体(interleukin 6 receptor，IL-6R)的结构与表达。IL-6R属免疫蛋白超家族型受体，但兼有造血因子受体超家族的特点，由A亚基(配基结合亚基，IL-6Ra，CD126)和B亚基(信号转导亚基，gp130)组成。gp130并非IL-6R所特有，它还是IL-10、IL-11、白血病抑制因子(UF)、抑瘤素(OM)、睫状神经营养因子(CNTF)等受体系统中信号转导的基本元件。IL-6首先与IL-6RA进行配基结合，形成IL-6-IL-6RA复合物，在膜外区诱导gp130空间结构变化而与之偶联。此复合物首先激活gp130相连的酪氨酸激酶，继而激活核因子NF-IL6，产生细胞功能应答。自然状态下，IL-6R以膜结合受体(membrane binding interleukin 6 receptor，mIL-6R)和可溶性受体(soluble interleukin 6 receptor，sIL-6R)这两种形式存在。与IL-6广泛的生物学活性相一致，mIL-6R广泛表达于多种组织细胞，包括EB病毒转化的B细胞、骨髓瘤细胞、髓样白血病细胞、肝细胞、活化的B细胞和静息的T细胞，人外周血单核细胞等。而sIL-6R存在于人的尿液、血液以及其他体液中。在某些疾病状态下，机体产生sIL-6R的水平显著升高。目前认为sIL-6R的产生机制有两种：一是细胞膜上的mIL-6R经蛋白酶水解脱落形成，二是体液中存在着编码sIL-6R的mRNA。IL-6的多种生物学活性主要是通过其与相应的mIL-6R结合所介导的，而sIL-6R却具有独特的生物学意义。大多数细胞因子的可溶性受体，如IL-2R、TNF-aR等，可与膜受体竞争结合配体，作为配体的拮抗剂发挥生理与治疗效应。然而，sIL-6R与配体IL-6结合所形成的复合物仍具有生物学功能，可进一步与IL-6受体的gp130结合并继续发挥IL-6的生物学作用。由于表达gp130的组织细胞非常广泛，而体液中sIL-6R能介导IL-6的生物学作用，这就扩大了IL-6作用的组织细胞谱，从而更广泛地发挥IL-6的多功能生物学作用。sIL-6R的这种介导增强IL-6的生物学意义，在机体的免疫调节中可能具有重要意义。IL-6R及sIL-6R在EMs中意义的研究很少，仅有的资料显示，EMs患者可能通过下调子宫内膜IL-6R的表达，从而抵制了IL-6对子宫内膜间质细胞的生长抑制作用，IL-6的这种反应性失调参与了EMs的发病机制。sIL-6R的效应与IL-6相似，可抑制分泌期子宫内膜的生长，其在EMs中的表达，文献报道极少且不一致。有作者报道EMs患者腹腔液和血中sIL-6R升高，但也有报道IL-6升高而sIL-6R下降，且与疾病的严重程度相关，还有作者报道没有改变。目的通过检测EMs患者腹腔液中活化巨噬细胞及其表面mIL-6R的表达，以及EMs患者腹腔液和血液中IL-6和sIL-6R的表达，探讨IL-6及IL-6R在EMs的发病机制中的意义，深入研究IL-6在EMs发病机制中的作用机理，期望能为EMs的诊治提供新的理论依据。材料与方法1．研究对象：在浙大医学院附属妇产科医院经腹腔镜或组织学检查确诊为EMs的住院病人47例为EMs组，根据r-AFS分期分为即A组(Ⅰ～Ⅱ期：19例)和B组(Ⅲ～Ⅳ期：28例)。选择同期经腹腔镜或组织学检查确诊为良性卵巢囊肿或先天性子宫畸形的患者22例为对照组。2．样本处理：手术前1天抽取外周静脉血2ml，取上清血浆置-70(?)冰箱保存待测。腹腔镜直视下抽取未污染腹腔液，离心后取上清液置-70(?)冰箱保存待测；沉淀细胞分离后提取巨噬细胞，制成巨噬细胞单细胞悬液待测。3．实验方法：流式细胞法：CD14-FITC和CD126-PE分别标记活化的巨噬细胞和mIL-6R，流式细胞法检测CD14~+、CD126~+及CD14~+／CD126~+的表达。EUSA：检测腹腔液和血浆中IL-6和sIL-6R含量。4．统计学分析：腹腔液中IL-6的含量差异大，非正态分布，取对数值处理后呈正态分布。所有数据以(?)±s表示，并通过方差齐性检验(P＞0.05)。3组间比较采用ANOVA法，两两比较采用Student-Newman-Keuls法，直线相关分析用于检验两指标之间的相关关系。所有数据采用SPSS13.0软件包进行统计学处理。当双侧检验的P＜0.05认为有显著性差异。结果1．EMs A组和B组腹腔液CD14~+、CD126~+及CD14~+／CD126~+的表达均显著高于对照组(P＜0.05)，其中EMs A组略高于EMs B组，但无统计学意义(P＞0.05)。2．腹腔液CD14~+、CD126~+及CD14~+／CD126~+的表达密切相关，CD14~+与CD126~+，CD14~+与CD14~+／CD126~+以及CD126~+与CD14~+／CD126~+之间均显示明显的直线相关，相关系数分别为0.657，0.698和0.991(P＜0.05)。3．对照组、EMs A组和EMs B组中CD126~+／CD14~+细胞占CD14~+细胞的百分率分别为81.74％，84.85％和85.867％，呈逐步上升趋势；而其占CD126~+细胞的百分率分别为98.91％，98.86％和98.61％，均接近99％。4．腹腔液中的IL-6含量EMs A组和EMs B组显著高于对照组(P＜0.05)，而腹腔液中的sIL-6R含量EMs B组显著高于EMs A组和对照组(P＜0.05)。5．血浆中的IL-6含量EMs B组显著高于EMs A组和对照组(P＜0.05)，而血浆中的sIL-6R含量EMs B组显著低于EMs A组和对照组(P＜0.05)。6．IL-6的含量升高与腹腔液CD14~+、CD126~+及CD126~+／CD14~+表达的升高保持一致性，但无明显的直线相关关系。7．EMs B组患者腹腔液sIL-6R含量升高，与腹腔液中IL-6含量的升高之间显示不一致性。8．EMs B组患者腹腔液sIL-6R含量显著高于A组和对照组(P＜0.05)，而其血浆中sIL-6R含量却显著低于A组和对照组(P＜0.05)，显示一定的负性相关关系。结论1．EMs患者腹腔液CD14~+表达显著增加，提示巨噬细胞参与EMs的发生发展。2．IL-6可能通过与腹腔液巨噬细胞膜表面的mIL-6R结合来发挥其生物学作用。3．活化的腹腔液巨噬细胞既是腹腔液IL-6的主要来源细胞，又是IL-6的主要作用细胞，巨噬细胞可能通过自分泌的方式增加其分泌的IL-6，促进了EMs的发生发展。4．B组EMs患者腹腔液中sIL-6R明显升高，提示腹腔液sIL-6R参与EMs的发病机制，并且可能与疾病的严重程度相关。5．B组EMs患者腹腔液中sIL-6R的升高伴随着血浆sIL-6R含量的显著降低，而与腹腔液IL-6含量无关。6．腹腔液局部IL-6的含量增高在EMs的发病机制中有着更重要的意义，但其含量与r-AFS分期无关。