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7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是合成头孢类抗生素的重要母核，头孢菌素C酰化酶（CCA）是一步酶法生产7-氨基头孢烷酸（7-ACA）的关键酶，能够将原料头孢菌素C（CPC）直接催化生成7-ACA。研究头孢菌素C酰化酶的生产工艺对实现一步酶法生产7-ACA具有重要的现实意义。本文主要对头孢菌素C酰化酶的分离提纯工艺及固定化技术进行了研究。首先，确定了化学渗透法为最佳提取工艺，次选为均质法。通过单因素试验确定了化学渗透法提取方法的最适渗透剂加量为1.0%，最佳渗透时间和温度分别为60min，35℃。确定了均质法的最佳均质压力为850bar。另外，确定了热处理的最佳温度、时间分别为45℃，60min。酶溶液沉淀时硫酸铵浓度为50%。其次，对固定化过程的主要影响因素进行了研究。通过对四种不同型号载体的实验结果比较，选择了固定化较适宜载体为HC-01型和ES-2型树脂；通过实验确定了其最佳工艺条件为：固定化温度：24~26℃，磷酸盐浓度：1.0M，投酶比：1000:1。进一步研究，通过裂解实验，确定了CPC酶一步裂解7-ACA反应条件为：裂解温度20℃，pH8.3，反应时间约90min；为实现一步酶法生产7-ACA打下基础。