【摘 要】
：
目的:探讨肠道菌群紊乱对急性肺损伤小鼠肺部炎症反应的影响,并通过分析TLR4/NF-κB信号通路,初步探讨肠道菌群对肺部疾病影响的可能机制。方法:6-8周龄的C57BL/6J小鼠随机分成三组:NS组、LPS组和FMT组,普通饲料适应性喂养1周,期间自由饮水。NS组小鼠先进行连续8天的无菌PBS缓冲液灌胃处理,用于对照,随后气管插管予以气管内注射药物LPS（25mg/kg）,连续给药4天,同时,继续
论文部分内容阅读
目的:探讨肠道菌群紊乱对急性肺损伤小鼠肺部炎症反应的影响,并通过分析TLR4/NF-κB信号通路,初步探讨肠道菌群对肺部疾病影响的可能机制。方法:6-8周龄的C57BL/6J小鼠随机分成三组:NS组、LPS组和FMT组,普通饲料适应性喂养1周,期间自由饮水。NS组小鼠先进行连续8天的无菌PBS缓冲液灌胃处理,用于对照,随后气管插管予以气管内注射药物LPS（25mg/kg）,连续给药4天,同时,继续灌胃无菌PBS液直至造模结束。LPS组小鼠采用共同使用四种临床常用抗生素联合的方法,打破正常的肠道微生态,致使肠道菌群失调,抗生素使用计量按小鼠每克体重计算:0.10mg/g新霉素、0.10mg/g氨苄西林、0.05 mg/g万古霉素及0.10 mg/g甲硝唑,持续灌胃8天,每天给药2次,随后处理同NS组,予以无菌PBS溶液灌胃4天。FMT组小鼠前期处理同LPS组小鼠,连续灌胃8天广谱抗生素及气管内注射脂多糖,随后给予小鼠进行健康小鼠体内采集的新鲜粪菌液移植处理（灌胃）,连续操作4天。造模结束,麻醉后处死小鼠,收集各组肺组织及肠道组织。称重测量各组的W/D值,HE染色后评估组织中病理的炎症反应程度。采用RT-q PCR检测炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的基因表达水平,采用Western blot检测TLR4/NF-κB通路的蛋白表达水平,同时高通量测序检测小鼠肠道中菌群的结构及分布情况。结果:实验结果显示,LPS组小鼠与NS组小鼠相对比,W/D值明显增高（P<0.05）,肺水肿更加严重,HE染色也显示在肺泡管和肺泡中有大量炎性细胞弥漫性的浸润,出血量增加,肺泡间隔增厚明显,出现局灶性肺不张,肺实变,病理损伤严重。而FMT组与LPS组相比较,肺部损伤严重程度减低,炎性细胞和出血情况减轻,肺水肿程度也有明显下降（P<0.05）。RT-q PCR结果显示LPS组的IL-1β、IL-6及TNF-α等基因表达水平较NS组有明显升高（P<0.05）,而经过粪菌移植后,FMT组炎症因子表达下调。WB结果显示LPS组的TLR4表达较NS组明显上调,NF-κB磷酸化增多,通路激活;对比LPS组,FMT组该通路蛋白表达水平有明显下降趋势（P<0.05）。肠道HE染色显示LPS组的肠道粘膜完整性遭到破坏,部分绒毛脱落,肠道内壁水肿;16sr DNA测序结果后发现LPS组菌群的多样性降低,优势菌群发生改变;对比FMT组的菌群测序结果,发现经过治疗后,肠道微生物的多样性及优势群种有显著的回归。结论:肠道菌群失调可以通过调节TLR4/NF-κB信号通路加重肺组织的炎症反应,健康的肠道菌群对LPS诱导的ALI具有保护作用。
其他文献
目的:对比经皮介入封堵术与经胸结扎术治疗婴幼儿巨大动脉导管未闭（PDA）的有效性、安全性。方法:回顾性纳入2017年1月1日至2020年1月1日于重庆医科大学附属儿童医院治疗的婴幼儿巨大PDA患者的临床资料,根据手术方式分为介入（经皮介入封堵术）组与结扎（经胸结扎术）组,比较两组患者的一般资料、手术成功率、手术时间、住院时间、输血率、儿科重症监护病房（PICU）入住率、并发症发生率及超声心动图资料
目的 本拉珠单抗（Benralizumab）是一种单克隆抗体,以白细胞介素5α受体为靶点,使血嗜酸性粒细胞耗竭。本研究系统评价本拉珠单抗辅助治疗重症嗜酸粒细胞型支气管哮喘的有效性及安全性。方法 使用计算机检索中英文数据库,例如万方,CNKI,VPCS,PubMed,Embase,The Cochrane图书馆,搜集本拉珠单抗辅助治疗重症嗜酸粒细胞型哮喘的相关随机对照试验（RCT）,检索时间为各数据
目的:探讨婴幼儿期自发性颅内出血的病因、影像学特点、并发症及治疗预后。方法:收集我院神经外科2011年1月至2018年12月收治的婴幼儿期（≤3岁）的自发性颅内出血患儿共131例,对其出血病因、临床表现、影像学检查结果、并发症、治疗方法及预后等临床资料进行分析。结果:本组患儿的出血病因主要包括晚发型维生素K依赖因子缺乏症（72例,54.9%）、动静脉畸形（16例,12.2%）、血友病（15例,11
目的:对比三种方法,常规治疗、静脉溶栓治疗和血管内治疗对大脑中动脉M2段（M2 segment of middle cerebral artery,MCA-M2）闭塞性急性脑梗死患者的临床疗效,为优化其治疗方案提供依据。方法:76例急性MCA-M2闭塞患者分别接受常规治疗（常规组,n=31）、静脉溶栓（溶栓组,n=27）和血管内治疗（血管内组,n=18）,比较3组疗效相关指标。结果:血管内组治疗后
目的:探究获得性血清pre-F Ig G抗体及鼻咽部黏膜局部Pre-F Ig A抗体与小于3月龄的小婴儿RSV感染后临床严重程度的相关性。方法:分析2019年12月至2021年3月于重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心一病区,年龄小于3月因肺炎或毛细支气管炎住院的患儿。根据是否检出RSV抗原或核酸,分为RSV感染组及非RSV感染组。采用ELISA法测定其血清Pre-F Ig G抗体、鼻咽抽吸物（NPA
目的:探讨迷走神经刺激术（Vagus nerve stimulation,VNS）治疗儿童药物难治性癫痫的安全性及有效性。方法:2016年1月至2020年6月54例VNS治疗患儿,进行为期24月的前瞻性随访。分别在术后2个月、6个月,12个月,18个月,24个月进行疗效及安全性评估,并在18个月,24个月建立Kaplan-Meier单因素生存分析以及Cox回归生存分析。结果:（1）26例女性患儿,
研究目的:初步分析重庆地区未成年人不同年龄段左室形态及功能正常参考值特征,并得出Z值回归方程。研究方法:2019年1月-2020年6月,招募重庆地区健康未成年人志愿者,测量心率、头围、胸围、身高、体重等生长指标,从而计算体表面积（BSA）,采集志愿者出生体重、母亲身高、母亲体重、父亲身高、父亲体重等一般资料。采用超声心动图（Echocardiography,echo）检测心脏结构指标:左室收缩末期
目的:关于牙龈组织的研究目前大多仍局限于使用传统二维（2D）细胞模型以及简单动物模型,体外三维模型应用较少且不简便。本课题设想利用构建PDE模型的方法建立人牙龈组织体外模型并验证其有效性,证明模型有效后结合药物诱导技术对健康牙龈组织进行炎性诱导,使之成为炎症模型并验证其有效性。在此基础上,后续可通过牙龈组织体外炎症模型探究牙周炎发生时在牙龈组织中的各种信号通路及机制研究,并可为牙周炎症的药物开发研
目的:探讨Fibrosis-4指数（FIB-4指数）与急性心肌梗死后患者全因死亡的关系。方法:纳入2016年1月至2019年1月在我院心内科确诊急性心肌梗死患者797例。采用三分位法将FIB-4指数分为三组,A组:FIB-4指数<3.19,共265例;B组:FIB-4指数3.19～8.14,共267例;C组:FIB-4指数≥8.14,共265例。采用Kaplan-Meier曲线比较三组间全因死亡发
背景:人偏肺病毒是除了人呼吸道合胞病毒外的第二大呼吸道病原体,五岁以上儿童感染率高达90%以上。课题组前期发现人偏肺病毒入胞过程有脂筏的参与,而表皮生长因子受体（EGFR）是定位于胞膜脂筏上的一种跨膜糖蛋白,在多种病毒的感染中发挥重要作用,于是本文主要探索EGFR在人偏肺病毒（hMPV）感染中的作用及其相关机制。方法:利用人支气管上皮细胞16HBE,使用Western blot检测细胞感染hMPV