口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)为口腔恶性肿瘤的主要类型,与迁延的慢性口腔炎症密切相关。近年来虽然治疗上取得一定进展,但由于原发部位延迟诊断、频繁的局部复发以及治疗后的颈部淋巴结转移,5年生存率仍然较低。实验室前期对同一病人来源的口腔扁平苔藓(oral lichen planu,OLP)和OSCC组织测序发现,相较于正常口腔黏膜,WNT信号通路配体WNT7B的表达在OLP、OSCC临床样本中呈现递增趋势。为探讨WNT7B在口腔慢性炎症和癌症发展中的作用,本课题选择肿瘤细胞与肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)之间的相互调节机制作为切入点,尝试探讨WNT7B是否参与OSCC细胞与TAMs细胞之间的信息交互。本文主要从以下几个部分开展研究:第一部分,WNT7B参与OLP和OSCC发展过程的临床验证。综合前期两位OSCC病人转录组数据以及GEO(gene expression omnibus,GEO)下载的三位病人的转录组数据分析,并结合临床病人组织qPCR及免疫组织化学实验,发现WNT7B表达在癌旁正常组织、OLP和OSCC组织中递增。提示WNT7B可能参与炎症到癌症的发展过程。第二部分,OSCC肿瘤细胞可通过某些分泌物质如WNT7B影响TAMs细胞的活化。首先用佛波醇酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导人单核细胞THP1分化成M0型巨噬细胞。收集培养OSCC细胞的上清以及实验室构建的WNT7B稳定敲低表达的OSCC细胞上清,刺激M0型巨噬细胞并研究其活化方向。结果表明,OSCC细胞上清可促进M0型巨噬细胞更多向经典活化(classically activated)M1方向活化;而WNT7B稳定敲减细胞的培养上清对M1型活化一定程度上减低。这提示WNT7B可能作为M1型巨噬细胞活化的调控因子。第三部分,M1型巨噬细胞分泌的炎性分子可改变OSCC肿瘤细胞的生理特性。通过脂多糖和干扰素将M0型巨噬细胞在体外诱导为M1型巨噬细胞,随后用诱导的M1型巨噬细胞的培养上清处理OSCC细胞,检测肿瘤细胞增殖和迁移等活性的改变,并探讨其WNT7B表达情况及WNT信号通路下游信号分子的改变。WNTs蛋白属于分泌性蛋白,我们研究中发现在OSCC细胞和巨噬细胞的信息交互中,出现蛋白水平与mRNA水平不一致的现象。而其它WNT配体如WNT3曾被报道通过外泌体途径释放及产生作用,我们猜测WNT7B可能通过外泌体形式进入上清液而被其它细胞摄取,介导信息交互。这部分工作仍在进行中。