甜瓜采后病害生防菌的筛选及其遗传改良的初步研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SYNJONES123
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甜瓜以营养丰富口味独特而深受世人青睐。同时,由粉红单端孢菌(Trichothecium roseum.)、镰刀菌(Fusarium spp.)、链格孢菌(Alternaria alternata)等引起的采后病害是造成腐烂损失的重要原因。长期以来,使用化学农药一直被认为是防治此类病害最有效的方法,但是存在着农药残留、环境污染和病原菌容易产生抗药性等诸多弊端,迫切需要新的安全的保鲜方法来取代化学农药的使用。但对这些病害高效、“绿色”防治药剂的缺乏也成了多年来困扰农业生产的世界难题。本研究旨在分离、筛选能够防治引起甜瓜采后病害主要病原真菌的生防菌株,并对其进行鉴定确定分类地位,对其生长和定殖能力进行测定、对生防能力进行评价、并对该菌株进行遗传改良,以提高其生防效果。采用直接生物测定的方法,从甜瓜表面分离到400多株有生防功能的菌株,经过复筛等得到2株对粉红单端孢菌(Trichothecium roseum)、镰刀菌(Fusarium spp.)、链格孢菌(Alternaria alternata)等3种病原菌防治效果在60%以上的菌株X4和2-17,对其进行研究。经形态特征观察、16S rDNA序列比对及生理生化特性测定,将菌株X4和2-17分别鉴定为:Pseudomonas fluorescens biovarⅢ和Pseudomonas putida biovar A。采用三亲杂交法,将抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)基因导入了野生菌株X4中,得到工程菌株X4-G。生防相关试验表明,所导入的基因可以在X4-G中稳定表达,有效地提高了菌株X4对甜瓜采后病害的生防能力。以碳酸钙微粉作为吸附剂,以菌株X4的发酵浓缩液为主要成份与用于果蔬采后病害防治的化学杀菌剂阿米西达(Amistar)进行复配,测定了菌药合剂在贮存过程中杀菌剂对生防菌的影响,结合生防相关特性试验,为生物制剂与化学杀菌剂的综合利用提供了技术贮备。
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