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目的:纯种发酵淡豆豉异黄酮提取物的制备及其抗乳腺癌活性研究。 方法:1、以染料木素和大豆苷元为目标产物,从前期分离4株发酵菌中筛选高效发酵菌并进行形态学、生理生化反应及分子学鉴定。2、优化淡豆豉纯种发酵工艺,大量制备提取淡豆豉异黄酮。3、使用MTT比色法、流式细胞检测细胞凋亡、细胞周期考察淡豆豉异黄酮对人乳腺癌细胞(MCF-7)生长的影响。 结果:1、1号发酵菌所产淡豆鼓有效含量(大豆苷元和染料木素)最高,经鉴定为蜡样芽孢杆菌。2、淡豆豉最佳发酵温度为25℃,最佳发酵时间为9天。3、纯种发酵淡豆豉异黄酮提取物有效含量约为6.2%(大豆苷元、染料木素合计)。 4、MTT比色法结果表明在12h~36h,浓度为5mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L,淡豆豉异黄酮对MCF-7抑制效果与对照组相比P<0.05,并与高浓缩大豆异黄酮(精制型有效含量80%)抑制效果无差异(P>0.05)。5、淡豆豉异黄酮能引发MCF-7约1.4%的细胞发生早期凋亡(P<0.01),使约94%细胞停滞在G0/G1期。 结论:1、淡豆豉的高效发酵菌为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。2、在25℃,发酵9天下可获得含大豆苷元和染料木素最高的淡豆豉。3、淡豆豉异黄酮对MCF-7生长有明显抑制作用,并引起细胞早期凋亡,阻滞细胞于G0/G1期。