液晶相细胞基底模型的构建及引导巨噬细胞行为的研究

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免疫反应在生物材料介导的组织修复过程中发挥重要作用,具有免疫调节性能的生物材料可获得有益的组织再生功效。巨噬细胞响应于生物材料性能对组织修复过程产生持续的影响,其中力学性能对引导这个响应起到关键作用。为了系统探究基质力学刺激对免疫细胞的行为和功能的影响,本研究基于仿生设计原则,模拟体内细胞所处的力学微环境,设计、构建一系列弹性模量可调的羟丙基纤维素酯液晶材料作为细胞基底模型,理解液晶软物质基底的力学特性引发的力学刺激对免疫细胞行为及功能影响。本文通过羟丙基纤维素(HPC)和酰氯的酯化反应过程中,在HPC刚性主链侧基引入不同的亚甲基单元数目(辛烷基、己烷基、丁烷基)以及调节取代度制备一系列弹性模量成梯度变化的液晶材料(CnPC),制作成系列液晶基底模型。采用先进测试技术对液晶基底进行理化性能表征;以巨噬细胞RAW264.7为研究对象,系统研究RAW264.7响应CnPC粘弹性力学刺激而发生的细胞行为和功能的变化,包括细胞初期粘附、细胞增殖、细胞凋亡等。通过细胞骨架染色、炎性相关基因表达和炎性相关细胞因子表达揭示液晶基底粘弹性引发的力学刺激对巨噬细胞M1/M2表型转化的诱导作用。结果表明,本文设计制备的CnPC具有胆甾型液晶特有的指纹织构,侧链软段长度和侧基取代度对CnPC分子间排列的有序度、CnPC的亲水性和力学性能有明显影响。细胞培养结果显示,CnPC具有优良的细胞相容性,为保持RAW264.7细胞活性提供有利的微环境。另外,CnPC的粘弹性力学刺激能引发RAW264.7细胞行为的系列响应,弹性模量低的液晶基底C4PC-2促进RAW264.7的M1型抗炎基因表达及促炎因子TNF-α分泌;弹性模量较高的C8PC组液晶基底明显增加RAW264.7细胞的铺展程度,促成细长伪足;同时,弹性模量高的C8PC-1液晶基底可增强M2型抗炎基因表达,抑制M1型相关基因和促炎细胞因子的表达,调控RAW264.7从M1到M2的表型转化。本研究仿生构建的CnPC液晶细胞基底模型为探索粘弹性软物质基底力学刺激调节巨噬细胞M1/M2型之间转化的相关机制提供了借鉴,为体外构建基于细胞培养模型的免疫微环境调控提供新的思路。
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