十个杨树优良无性系RSAP、CDDP、SSR指纹图谱构建研究

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为选育杨树新品种以及鉴定选育品种之间亲缘关系,加快白杨无性系选育的步伐,促进杨树优异种质资源的挖掘,推动杨树遗传改良进程,方便优异杨树种质资源的推广栽植。本试验以杨树10个优良无性系(秦白杨1、3、5号、新疆杨、84K、I-101、毛白杨30号、07-17-18、07-23-23、07-30-11)为材料,分别采用3个分子标记RSAP、CDDP、SSR进行遗传多样性分析。结合毛细管电泳法检测扩增产物的多态性,基于UPGMA进行聚类分析,构建了 10个杨树无性系的指纹图谱,比较了 3个分子标记的效率,有利于开展杨树遗传改良研究和优良品种生产推广。研究表明:(1)9条RSAP引物组成的36对引物组合中筛选出6对扩增效果较好的组合,共扩增多态位点133个,平均扩增引物数为22.17条,供试无性系间的遗传相似系数为0.400~0.817,平均Shannon信息指数为0.326,平均Nei基因多样性指数为0.488,遗传变异丰富。仅2个引物组合Rs2/Rs4、Rs2/Rs7即可将供试无性系全部鉴别开来,每个无性系都具有其独特的图谱信息。聚类结果显示,10个杨树无性系被分成两大类,新疆杨和毛白杨30号聚为一大类,其余无性系聚为另一类,与实际亲缘关系大致相符。(2)8条筛选出来多态性强的CDDP引物在供试无性系中共扩增出86个多态位点,平均每个引物扩增10.75个,平均Shannon信息指数和Nei基因多样性指数分别为0.468和0.303,无性系间的遗传相似系数为0.410~0.774。引物MYB2和引物ERF1结合起来可鉴别全部供试无性系。在遗传相似系数为0.510时,将无性系分为两组,新疆杨和毛白杨30号为一组,其余无性系为另一组,大体与生物学分类一致。(3)20对SSR引物筛选出7对位点扩增多态性高的引物,扩增的多态性位点共41个,平均每对引物扩增5.9个。无性系间遗传相似系数为0.415~0.902,平均Shannon信息指数和平均Nei’s基因多样性指数分别为1.433和0.694,遗传变异丰富。引物PMGC-2020和PMGC-2607可将供试无性系全部区分。聚类分析显示,秦白杨系列与84K聚为一类,07系列I-101聚为一类,与实际亲缘关系相符。(4)通过比较3个分子标记体系的PPB、PIC、MI、Rp等指标的大小,分析3个标记的多态性、聚类结果、标记效率。3个分子标记的PPB最大的是SSR标记(100.00%),PIC 最高的是 RSAP 标记(0.9542);Rp 最大的是 CDDP 标记(18.82),MI值最大的是CDDP标记(1.07)。通过PPB和PIC值可以看出,SSR标记的位点信息量最高,而RSAP标记的多态性最高。从综合效率鉴定指标MI和Rp来看,CDDP的标记效率最高,具有较强的引物鉴别能力。RSAP、CDDP标记在杨树遗传多样性和遗传结构研究方面具有一定的适用性。
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