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血吸虫分布广泛,对人类健康及畜牧业的危害非常严重。目前血吸虫病的诊断方法主要是免疫学诊断,检测使用的抗原多为虫卵或成虫抗原,来源受到很大的限制；而分子生物学方法获得的抗原纯度虽然较高,但敏感性低。因此,人们迫切希望获得针对性强、诊断效率高、容易制备的抗原,代替粗抗原或全长的分子抗原。本课题利用B细胞抗原表位预测软件从信息学途径寻找有效的抗原分子。利用软件从日本血吸虫的蛋白库里筛选2个抗原表位预测分值高的蛋白：SjRibosomal_L18ae (AY813148, AAW24880), SjHABP4_PAI-RBP1(AY815608, AAW27340)。对其研究包括：(1)根据蛋白的核酸,蛋白序列对其进行生物信息学分析；(2)重组蛋白克隆和表达、纯化；(3)重组蛋白、vestern-blotting分析；(4)基因的各虫期转录特异性分析；(4)重组蛋白的潜在诊断价值分析(5)人工合成的抗原表位的潜在诊断价值分析。SjRibosomal_L18ae是一个核糖体蛋白,属于L18家族的,在细胞中与RNA分子的核心结构域结合,以发挥功能。研究中构建SjRibosomal_L18ae/pET-28a重组质粒,IPTG诱导表达重组蛋白,为包涵体,通过pH梯度溶液洗脱蛋白,获得较高纯度的重组蛋白；Western-bloting实验中与阴性阳性血清反应,均有反应条带。转录特异性分析表明SjRibosomal_L18ae基因在各个虫期均高水平的转录。采用ELISA检测患者和正常人的血清,敏感性和特异度分别为53.3%和100%；说明其诊断价值较弱。采用Bepipred等软件预测SjRibosomal_L18ae(?)勺抗原表位,再人工合成抗原表位P1,P2。ELISA检测患者和正常人的血清,P1敏感性和特异性分别为60%和100%,P2敏感性和特异性分别为70%和100%,说明P2有一定的潜在的诊断价值。SjHABP4_PAI-RBP1家族包括了HABP4家族中的透明质烷结合蛋白,以及PAI-1mRNA结合蛋白PAI-RBP1。研究中构建SjHABP4_PAI-RBP1/pET-28a重组质粒,IPTG诱导表达重组蛋白,为包涵体,通过pH梯度溶液洗脱蛋白,获得较高纯度的重组蛋白；Western-blotting实验中与阴性阳性血清反应,均有反应条带。转录特异性分析结果显示,SjHABP4_PAI-RBP1童虫转录水平最高,胞蚴,虫卵,雄虫转录水平较高,毛蚴转录水平较低,尾蚴和雌虫不转录。说明SjHABP4_PAI-RBP1的各个虫期转录水平不同,有的虫期发挥作用,有的虫期无作用。采用ELISA检测患者和正常人的血清,敏感性和特异性分别为60%和100%；说明其诊断价值不大。