子痫前期（PE）多发生于妊娠20周后，以高血压和蛋白尿为主要特征，伴全身多器官功能损害或功能衰竭，严重者可出现抽搐、昏迷，甚至死亡。目前，诱发子痫前期的病因及病理机制仍是围产医学中广泛研究的重要课题。因此，子痫前期中胎盘组织内信号转导途径的改变，是研究PE发生发展的关键性环节之一。促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases, MAPK）是广泛存在于真核生物细胞内的一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，其家族主要由c-Jun-N-终端激酶（JNK）、p38激酶和细胞外信号转导激酶（ERK）等组成。MAPK通过将细胞外的刺激信号传导至细胞内，从而引起细胞发生增殖、分化、转化及凋亡等生物学反应。ERK主要介导细胞增殖、分化、转化，而JNK和p38则与细胞损伤、炎症、梗死、氧化应激反应密切有关，三者之间既各自独立，也相互作用，共同参与完成细胞内各种信号的转导。子宫螺旋动脉和管腔中滋养细胞层的重铸障碍，导致胎盘缺氧缺血灌注不足，胎盘炎性因子等过度激活，使得滋养细胞、血管内皮细胞等发生功能障碍，最终导致PE发生。通过以往对子痫前期胎盘滋养细胞的体外培养发现，p-ERK的表达较正常下降而p-p38的表达却与滋养细胞毫无关系。然而通过动物实验发现p38α的高表达与胎盘的形成缺陷相关，可引起胎盘滋养细胞、间质细胞凋亡增加，最终导致胎鼠的死亡率上升。因此，PE中MAPK信号转导通路蛋白对滋养细胞的调节仍需进一步研究。本课题以子痫前期和正常妊娠妇女的血清和胎盘组织进行研究，检测PE组和正常妊娠组血清中TNF-α、IL-6，胎盘组织中MAPK转导通路相关蛋白（p38、JNK、ERK）、凋亡蛋白以及MMP-9和TIMP-1的表达。通过对MAPK信号转导通路及凋亡蛋白的研究，探明引发子痫前期的主要靶蛋白，为子痫前期发生的病理机制及病理生理学研究提供实验依据。本研究总共包括三个部分：实验一子痫前期患者胎盘组织中MAPK信号转导通路相关蛋白的表达目的：研究在子痫前期外周血肿瘤坏死因子TNF-α与胎盘组织MAPK信号转导通路相关蛋白的相关性，探明子痫前期的主要靶蛋白，为子痫前期的病理机制提供依据。方法：采用病例对照研究，选择西京医院妇产科住院分娩的子痫前期孕妇和正常妊娠妇女各45例，通过ELISA分析两组孕妇血清中TNF-α、IL-6，免疫组化与蛋白印记检测胎盘组织中MAPK信号转导通路相关蛋白以及NF-κBp65、c-fos、c-Jun，并进行相关性分析。结果：（1）子痫前期血清中TNF-α、IL-6水平明显高于正常妊娠组1.56±0.3vs0.85±0.1pg/ml、95.31±1.38vs56.40±1.45pg/ml，P<0.01；(2)子痫前期组胎盘滋养细胞中p-p38、p-JNK的表达均高于正常妊娠组（P<0.01），而p-ERK的表达则低于正常妊娠组（P<0.01），MAPK信号转导通路下游分子NF-κBp65、c-fos、c-Jun在子痫前期组表达均增高（P<0.01）；（3）子痫前期血清TNF-α的表达与胎盘组织p-p38、p-JNK表达呈正相关（r=0.623p＜0.01、r=0.715,p＜0.01），与p-ERK的表达呈负相关（r=-0.689, p<0.01）。结论：MAPK信号转导通路相关蛋白在子痫前期的发病过程中发挥重要作用，p-p38、p-JNK通过NF-κBp65、c-fos、c-Jun入核呈正反馈参与子痫前期的发病机制。血清TNF-α的变化可以间接反应胎盘组织中p-p38、p-JNK蛋白的变化情况。实验二凋亡蛋白在子痫前期患者胎盘中的表达目的：研究半胱天冬氨酸蛋白酶-3.8.9（Caspase-3.8.9）在子痫前期患者胎盘中的表达。方法：选择2010年8月-2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇40例，分为子痫前期组20例、正常妊娠(对照)组20例，采用免疫组化法、蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘中Fas/FasL、Caspase-3.8.9以及Bcl-2/Bax的表达。结果：Caspase-3.8.9在子痫前期胎盘和正常妊娠胎盘中均有表达；在子痫前期患者胎盘中，Fas/FasL、Caspase-3.8.9表达与正常胎盘相比显著升高(P<0.01)，而Bcl-2/Bax则低于其在正常胎盘中的比例（P<0.01）。结论：子痫前期患者胎盘组织中滋养细胞可通过Fas/FasL转导作用于Caspase-3.8.9高表达，线粒体Bcl-2/Bax比例失衡，导致滋养细胞凋亡增加。高表达Caspase-3.8.9、Bcl/Bax比例失衡诱导子痫前期患者胎盘组织滋养细胞凋亡增加，可能是子痫前期发生的重要病理因素。实验三MMP-9和TIMP-1在子痫前期患者胎盘组织中的表达目的：研究基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9，MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1，TIMP-1）在重度子痫前期患者胎盘中的表达。方法：选择2010年8月-2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇40例，分为子痫前期组20例、正常妊娠(对照)组20例，采用免疫组化法、蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘滋养细胞中MMP-9、TIMP-1的表达。结果：在子痫前期组胎盘滋养细胞MMP-9的表达比正常胎盘滋养细胞中显著下降(P<0.01)，TIMP-1的表达则比正常胎盘滋养细胞中显著升高(P<0.01)，且MMP-9/TIMP-1的比值明显低于正常妊娠胎盘中的表达。结论：子痫前期患者胎盘组织中MMP-9、TIMP-1的异常表达可能与滋养细胞侵入障碍相关。