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目的:探讨生命不同阶段炎症暴露对雄性小鼠生殖内分泌的持续损害作用,主要包括出生前LPS暴露对雄性小鼠睾丸发育、睾酮合成和精子发生过程的长期损害效应,以及成年期LPS急性暴露对雄性小鼠睾酮合成和睾丸组织形态的损害效应。方法:本研究由两个实验组成。实验1,为探讨出生前LPS暴露对雄性小鼠生殖内分泌的长期损害作用,孕鼠被随机分为对照组和LPS组。LPS组孕鼠自妊娠第13天(GD 13)至GD 17每日经腹腔注射给予LPS(50mg/kg),而对照组被给予等容积生理盐水(NS)处理。GD18时,每组12只孕鼠被处死并取出胎鼠,辨别性别后称重;雄性胎鼠取血后收集血清,采用放射免疫法(RIA)检测血清睾酮(T)水平;取胎鼠睾丸置于MDF液中固定,进行睾丸病理组织学检查;采用免疫组织化学法(IHC)检测睾丸3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达。其余孕鼠自然分娩,出生后第21天(PND 21)时将仔鼠断乳并保持每笼留有5只小鼠,PND 26时分别测量雄性和雌性仔鼠的肛门生殖器距离(AGD);PND 35和63时,每组分别随机选择6只雄鼠,取血后颈椎脱臼处死,取睾丸、前列腺和精囊等组织,并称重;收集雄性仔鼠血清,用RIA法检测雄鼠血清T含量,用ELISA法检测血清黄体生成素(LH)含量;将左侧睾丸置于MDF液中固定,进行睾丸HE染色,用免疫组织化学法分析睾丸组织3β-HSD表达;取PND 63仔鼠附睾尾部进行精子计数。实验2,为探讨成年期LPS急性暴露对雄性小鼠生殖内分泌的损害效应,30只健康成年雄性小鼠被随机分入对照组和LPS组。LPS处理组小鼠经腹腔注射给予LPS(1 mg/kg),对照组给予等容积NS。LPS处理后不同时点(3、6、12和24 h)将小鼠分批剖杀,双侧睾丸称重并计算其脏器系数;睾丸组织HE染色后观察病理组织学改变;采用RIA法检测小鼠血清睾酮含量;用免疫组化法标记3β-HSD,以观察睾丸间质细胞数量的变化;用定量RT-PCR技术检测小鼠睾丸睾酮合成酶m RNA表达水平;用蛋白质免疫印迹法检测睾丸睾酮合成酶相关蛋白质水平。结果:孕晚期小鼠暴露LPS(50mg/kg)后,GD18雄性胎鼠体重明显降低,胎鼠睾丸间质细胞出现异常聚集;PND 26雄性仔鼠AGD明显减小;PND 35雄性仔鼠睾丸、前列腺和精囊重量明显下降,血清睾酮水平显著降低;睾丸I-VI期生精小管的百分比明显减少,而IX-XII期生精小管百分比却明显上升,且在部分小鼠睾丸生精小管内观察到生精细胞大量脱落现象;PND 63雄性仔鼠血清T含量明显降低,附睾尾精子数量显著减少。成年期雄鼠急性暴露LPS(1 mg/kg)后,12和24 h小鼠睾丸重量、睾丸系数均明显增加,睾丸组织生精上皮结构被破坏,管内生精细胞数量减少;LPS处理后3、6和12 h小鼠血清睾酮水平明显下降,但小鼠睾丸间质细胞数量无明显变化;进一步研究结果发现,LPS处理明显下调小鼠睾丸T合成酶(St AR、17β-HSD、CYP17A1和CYP11A1等)m RNA表达,以及睾丸St AR蛋白表达。结论:生命不同阶段炎症暴露可持续损害雄性小鼠生殖与内分泌功能,即出生前LPS暴露持续抑制雄性小鼠睾酮合成,损害小鼠睾丸发育,并导致成年后小鼠精子发生障碍;成年期急性LPS暴露引起睾丸组织病理学损害,并通过下调睾丸睾酮合成酶表达而降低小鼠血清睾酮含量。