【摘 要】
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目的: 研究葛根素对极低频电磁场(ELF-EMFs)引起的豚鼠巩膜及体外培养的人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)病理改变的作用。 方法: 利用自制的稳定可调的模拟生活辐照磁场的
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目的: 研究葛根素对极低频电磁场(ELF-EMFs)引起的豚鼠巩膜及体外培养的人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)病理改变的作用。 方法: 利用自制的稳定可调的模拟生活辐照磁场的 ELF-EMFs系统分别对出生1周的豚鼠和体外培养的HFSFs进行辐照,同时给予葛根素干预。 记录豚鼠在实验0、2、4、8周时屈光度和眼轴长度,实验结束时处死豚鼠,对其眼后极部巩膜进行 HE染色光学显微镜检查和透射电子显微镜检查。 MTT法检测HFSFs经ELF-EMFs(0.2mT,50Hz)辐射0、12、24、48h后的增殖活性,以及 ELF-EMFs(0.2mT,50Hz,24h)与不同浓度葛根素(0?M、0.1?M、1?M、10?M)同时干预下HFSFs增殖活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测ELF-EMFs(0.2mT,50Hz,24h)作用下不同浓度葛根素组HSFs内COL1A1和 MMP-9 mRNA转录水平;蛋白印迹法(Western Blot)检测ELF-EMFs(0.2mT,50Hz,24h)作用下不同浓度葛根素组 HFSFs内COL1A1和MMP-9蛋白表达量。 结果: 与对照组相比,辐射组豚鼠在经过ELF-EMFs辐照4周后,屈光度下降幅度和眼轴增长幅度变化明显(P<0.05),辐照时间越长变化越明显,而葛根素干预后豚鼠屈光度下降幅度和眼轴增长幅度减小。HE染色光镜检查与电镜检查结果显示 ELF-EMFs作用下豚鼠巩膜胶原纤维排列紊乱、变形,小直径纤维数量增多,而葛根素干预下变化明显减轻。 体外培养的HFSFs经ELF-EMFs(0.2mT、50Hz)作用24小时后,增殖活性开始降低,COL1A1表达下调,而MMP-9表达上调;1?M起葛根素可使ELF-EMFs(0.2mT、50Hz、24h)作用下HFSFs增殖活性增强,0.1?M起葛根素可使HFSFs内COL1A1蛋白表达和mRNA转录上调,而MMP-9蛋白表达和mRNA转录下调。 结论: ELF-EMFs可使豚鼠屈光度下降幅度和眼轴增长幅度增大,豚鼠巩膜微结构发生形态学改变,使体外培养的HFSFs增殖活性下降、COL1A1表达上调、MMP-9表达下调,是巩膜发生病理性重塑改变的一个可能诱发因素,而葛根素可对抗保护 ELF-EMFs引起的豚鼠巩膜和HFSFs的病理改变,是ELF-EMFs诱发的巩膜病理改变的一个保护性因素。
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